天然藥物防齲的物質(zhì)基礎(chǔ)研究——蜂房防齲有效成分的化學(xué)研究.pdf

1、一直以來(lái)，齲病的有效預(yù)防都是國(guó)內(nèi)外的研究重點(diǎn)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者致力于天然藥物的防治齲病研究，本課題組在國(guó)內(nèi)外首次開(kāi)展中藥防齲的系列研究，通過(guò)對(duì)11味中藥的防齲篩選實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)蜂房(NidusVespae)具有良好的防齲效能。在體外抑齲實(shí)驗(yàn)中，即使在不影響各實(shí)驗(yàn)菌株生長(zhǎng)的較低濃度下也可有效抑制致齲菌的產(chǎn)酸，合成胞外多糖及早期黏附等致齲毒力因子，在生物膜模型中隨著蜂房提取物溶液的加入，顯著減少了變形鏈球菌在羥磷灰石片上黏附的量以及胞外基質(zhì)

2、的量，提示蜂房溶液的加入可能對(duì)菌斑的致齲化轉(zhuǎn)變有一定的抑制作用。本研究在前期研究的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代的分離手段對(duì)蜂房的化學(xué)成分進(jìn)行提取、分離和鑒定，研究蜂房化學(xué)成分對(duì)口腔細(xì)菌的生長(zhǎng)、代謝、黏附作用，以及蜂房化學(xué)成分對(duì)牙體硬組織的作用，并采用先進(jìn)的口腔生物膜模型，研究蜂房藥效成分對(duì)口腔細(xì)菌生物膜的作用，以此對(duì)蜂房的防齲物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行系統(tǒng)研究。 方法：用現(xiàn)代的分離手段分離、提取和鑒定蜂房化學(xué)組分和化學(xué)單體，針對(duì)常見(jiàn)致齲菌的主要毒力因子進(jìn)

3、行系統(tǒng)的體外抑齲實(shí)驗(yàn)，評(píng)估蜂房化學(xué)成分對(duì)口腔常駐細(xì)菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸、產(chǎn)糖及黏附的作用；利用pH循環(huán)模型評(píng)價(jià)蜂房化學(xué)成分對(duì)牙體硬組織的作用；定植4種口腔常駐菌于實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中，并在穩(wěn)定的培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)以建立體外生物膜模型并對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)測(cè)試；通過(guò)對(duì)模型恒流培養(yǎng)室中定時(shí)給以含4mg/ml藥物粗提物的蔗糖溶液，觀察實(shí)驗(yàn)生物膜上活菌附著情況以及表面微結(jié)構(gòu)，并連續(xù)觀察培養(yǎng)系統(tǒng)中的pH動(dòng)態(tài)反應(yīng)，觀察其對(duì)實(shí)驗(yàn)生物膜的影響。 結(jié)果：1.本實(shí)驗(yàn)分離得到

4、蜂房的5個(gè)化學(xué)組分(NVE1、NVE2、NVE3、NVE4、NVE5)和4個(gè)化學(xué)單體(ZWC1、ZWC2、β-谷甾醇、β-胡蘿卜甙)，并首次在蜂房中分離到β-谷甾醇和β-胡蘿卜甙；2.體外實(shí)驗(yàn)證明蜂房提取物的抑齲能力較強(qiáng)，在不影響各實(shí)驗(yàn)菌株生長(zhǎng)的較低濃度下也可有效抑制產(chǎn)酸，產(chǎn)胞外多糖及早期黏附等致齲毒力因子，pH循環(huán)模型證實(shí)蜂房提取物NVE1對(duì)釉質(zhì)脫礦沒(méi)有明顯的抑制或促進(jìn)作用；3.在生物膜模型中，與25mM蔗糖組相比，顯著減少了羥磷灰石