天然藥物厚樸防齲作用的藥效學(xué)研究.pdf

1、現(xiàn)代齲病學(xué)理論認為維持和調(diào)節(jié)口腔細菌的生態(tài)平衡是防治齲病的關(guān)鍵。現(xiàn)有的防齲措施存在著諸多不足，天然藥物因來源豐富，取材方便，用法簡單，療效顯著，毒副作用輕微而倍受關(guān)注。中藥防病健齒的古方和理論為中藥防齲研究奠定了基礎(chǔ)。本課題組在國內(nèi)外率先開展天然防齲藥物的篩選和防齲機制的研究，已經(jīng)建立了防齲多指標活性篩選體系和藥效學(xué)研究實驗方法。天然植物藥厚樸具有很強的抗菌作用，能夠明顯抑制主要致齲菌變形鏈球菌的生長及其GTF酶活性，但目前有關(guān)厚樸的防

2、齲研究不夠系統(tǒng)深入，對其有效成分及其防齲機制還缺乏進一步的認識，因此，本研究將采用體外篩選實驗對厚樸防齲有效成分進行追蹤、分離，綜合評估其防齲效能，同時采用防齲藥物療效判斷的藥效學(xué)實驗方法，從口腔細菌生物膜和牙齒礦化兩方面進行藥效學(xué)評價，探討厚樸防齲的藥理作用機制。 方法：利用現(xiàn)代分離手段提取、分離厚樸化學(xué)組分，針對致齲菌的主要毒力因子進行防齲多指標活性篩選實驗，追蹤厚樸防齲有效成分，評估厚樸有效成分對口腔常駐菌生長、產(chǎn)酸、產(chǎn)胞

3、外多糖的作用；通過對口腔細菌生物膜 MBEC(minimum biofilm eradication concentration)、MBIC(mimmum biofilm inhibition concentration) 以及MBRC (minimum biofilm reduction concentration)的測定，研究和評估厚樸有效成分對生物膜的形成和清除作用；利用CLSM結(jié)合特異熒光染料標記口腔細菌生物膜中死菌和活菌的方法

4、觀察藥物作用下細菌生物膜形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變化及對生物膜活性的影響；利用pH循環(huán)模型評價厚樸有效成分對牙體硬組織的作用。 結(jié)果： 1.經(jīng)分離得到厚樸的A、B、C、D四個化學(xué)組分，篩選出B組分為厚樸抗齲的活性成分，經(jīng)鑒定B組分主要含厚樸酚及和厚樸酚。 2.體外防齲多指標篩選實驗發(fā)現(xiàn)B組分與厚樸酚、和厚樸酚具有相同的抑菌效果，在不影響實驗菌株生長的濃度下厚樸酚及和厚樸酚能夠有效抑制細菌產(chǎn)酸，但對細菌產(chǎn)胞外多糖及乳酸脫氫酶的

5、活性沒有明顯的抑制作用。 3.研究藥物對細菌生物膜生長的作用，發(fā)現(xiàn)細菌在MBEC<'TM>-Device上可形成良好的生物膜，厚樸有效成分能夠抑制口腔細菌生物膜的形成，并可破壞已經(jīng)形成的生物膜；CLSM下觀察藥物作用后生物膜結(jié)構(gòu)松散、管道不清，死菌增多，生物膜厚度降低。 4.厚樸有效成分對牙齒硬組織脫礦沒有明顯的抑制或促進作用。 結(jié)論：通過對天然藥物厚樸的分離提取，結(jié)合活性篩選實驗，得到厚樸防齲的有效成分----