天然藥物厚樸防齲作用的藥效學(xué)研究.pdf

1、現(xiàn)代齲病學(xué)理論認(rèn)為維持和調(diào)節(jié)口腔細(xì)菌的生態(tài)平衡是防治齲病的關(guān)鍵。現(xiàn)有的防齲措施存在著諸多不足，天然藥物因來(lái)源豐富，取材方便，用法簡(jiǎn)單，療效顯著，毒副作用輕微而倍受關(guān)注。中藥防病健齒的古方和理論為中藥防齲研究奠定了基礎(chǔ)。本課題組在國(guó)內(nèi)外率先開(kāi)展天然防齲藥物的篩選和防齲機(jī)制的研究，已經(jīng)建立了防齲多指標(biāo)活性篩選體系和藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法。天然植物藥厚樸具有很強(qiáng)的抗菌作用，能夠明顯抑制主要致齲菌變形鏈球菌的生長(zhǎng)及其GTF酶活性，但目前有關(guān)厚樸的防

2、齲研究不夠系統(tǒng)深入，對(duì)其有效成分及其防齲機(jī)制還缺乏進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，因此，本研究將采用體外篩選實(shí)驗(yàn)對(duì)厚樸防齲有效成分進(jìn)行追蹤、分離，綜合評(píng)估其防齲效能，同時(shí)采用防齲藥物療效判斷的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，從口腔細(xì)菌生物膜和牙齒礦化兩方面進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)，探討厚樸防齲的藥理作用機(jī)制。 方法：利用現(xiàn)代分離手段提取、分離厚樸化學(xué)組分，針對(duì)致齲菌的主要毒力因子進(jìn)行防齲多指標(biāo)活性篩選實(shí)驗(yàn)，追蹤厚樸防齲有效成分，評(píng)估厚樸有效成分對(duì)口腔常駐菌生長(zhǎng)、產(chǎn)酸、產(chǎn)胞

3、外多糖的作用；通過(guò)對(duì)口腔細(xì)菌生物膜 MBEC(minimum biofilm eradication concentration)、MBIC(mimmum biofilm inhibition concentration) 以及MBRC (minimum biofilm reduction concentration)的測(cè)定，研究和評(píng)估厚樸有效成分對(duì)生物膜的形成和清除作用；利用CLSM結(jié)合特異熒光染料標(biāo)記口腔細(xì)菌生物膜中死菌和活菌的方法

4、觀察藥物作用下細(xì)菌生物膜形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變化及對(duì)生物膜活性的影響；利用pH循環(huán)模型評(píng)價(jià)厚樸有效成分對(duì)牙體硬組織的作用。 結(jié)果： 1.經(jīng)分離得到厚樸的A、B、C、D四個(gè)化學(xué)組分，篩選出B組分為厚樸抗齲的活性成分，經(jīng)鑒定B組分主要含厚樸酚及和厚樸酚。 2.體外防齲多指標(biāo)篩選實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)B組分與厚樸酚、和厚樸酚具有相同的抑菌效果，在不影響實(shí)驗(yàn)菌株生長(zhǎng)的濃度下厚樸酚及和厚樸酚能夠有效抑制細(xì)菌產(chǎn)酸，但對(duì)細(xì)菌產(chǎn)胞外多糖及乳酸脫氫酶的

5、活性沒(méi)有明顯的抑制作用。 3.研究藥物對(duì)細(xì)菌生物膜生長(zhǎng)的作用，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌在MBEC<'TM>-Device上可形成良好的生物膜，厚樸有效成分能夠抑制口腔細(xì)菌生物膜的形成，并可破壞已經(jīng)形成的生物膜；CLSM下觀察藥物作用后生物膜結(jié)構(gòu)松散、管道不清，死菌增多，生物膜厚度降低。 4.厚樸有效成分對(duì)牙齒硬組織脫礦沒(méi)有明顯的抑制或促進(jìn)作用。 結(jié)論：通過(guò)對(duì)天然藥物厚樸的分離提取，結(jié)合活性篩選實(shí)驗(yàn)，得到厚樸防齲的有效成分----