復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者免疫治療前后外周血T淋巴細(xì)胞表達(dá)率的變化與治療效果的臨床觀察.pdf

1、研究背景:
　　復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指發(fā)生在妊娠28周之前連續(xù)3次和3次以上的自然流產(chǎn)，且不存在弓形蟲等生殖道感染、內(nèi)分泌、子宮附件解剖異常、自身免疫功能異常，以及染色體異常等病因。自然流產(chǎn)是指除人為因素，由某些原因所致胚胎或胎兒從母體自動脫離的現(xiàn)象?，F(xiàn)今我國由于人們周圍環(huán)境污染輻射等的影響和生活方式的改變，使得復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生率逐年升高。造成RSA的原因有很多，目前

2、大致可分為非免疫性和免疫性兩類。非免疫因素包括遺傳因素（包括染色體異常）、解剖結(jié)構(gòu)畸形、感染因素、內(nèi)分泌因素、微量元素缺乏等。免疫因素可分為兩類:自身相關(guān)型和同種免疫型，同種免疫型包括原因不明型。自身相關(guān)型具有重要作用的有抗磷脂抗體(APA)、抗精子抗體(ASA)等。同種免疫型中起重要作用的有T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等。臨床常用T淋巴細(xì)胞活化比率來表示封閉抗體，作為檢測指標(biāo)。封閉抗體缺乏可視為T淋巴細(xì)胞活化比率不足。不足以使母體對胚胎等妊娠

3、組織產(chǎn)生免疫耐受，導(dǎo)致父系抗原被母體免疫系統(tǒng)識別而殺傷，使胚胎受到免疫攻擊而流產(chǎn)。所以對于妊娠的健康婦女，具有相當(dāng)數(shù)量的調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞非常重要，可使母體對胚胎（半同種異體抗原）產(chǎn)生免疫耐受，發(fā)揮免疫防護(hù)作用，利于妊娠;如果外周血中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的數(shù)量減少，胚胎就會遭受免疫系統(tǒng)攻擊，使母體對胚胎的免疫耐受力降低，導(dǎo)致流產(chǎn)發(fā)生?，F(xiàn)國內(nèi)外研究淋巴細(xì)胞免疫療法是治療封閉抗體陰性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者最常用的治療方法。有學(xué)者認(rèn)為其可提高患者妊娠率高達(dá)

4、87％。淋巴細(xì)胞免疫療法即采用丈夫或者健康男性（第三者）的外周血，經(jīng)過離心后將男方的血清淋巴細(xì)胞注入患者皮下組織，使患者被動的產(chǎn)生自身免疫調(diào)節(jié)，從而使外周血中的調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的數(shù)量增加，誘導(dǎo)母體產(chǎn)生免疫耐受，當(dāng)其再次妊娠時，就可以減少對胚胎半同種異體抗原的免疫攻擊，故可保護(hù)胚胎，維持妊娠。但其療效學(xué)術(shù)界有分歧，且治療過程長，治療后轉(zhuǎn)陽與未轉(zhuǎn)陽對于是否可以成功妊娠的有效率不肯定，本論文在排除復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者子宮缺如、雙側(cè)輸卵管阻塞、陰道缺

5、如等解剖因素;弓形蟲、風(fēng)疹病毒、HPV等感染因素;抗心磷脂抗體陽性、抗核抗體陽性、抗甲狀腺抗體陽性等免疫因素，男方性功能障礙、先天性精子畸形等男方因素，及多囊卵巢綜合癥、卵巢早衰、高泌乳素血癥等內(nèi)分泌因素等影響妊娠的因素后，對封閉抗體陰性的RSA患者主動免疫治療前、后采用流式細(xì)胞檢測儀測定外周血T淋巴細(xì)胞(CD3+、CD4+和CD8+)封閉效率，分析其變化，了解免疫治療效果，并且隨訪妊娠及保胎成功率，進(jìn)一步探討免疫治療測定T淋巴細(xì)胞（C

6、D3+、CD4+和CD8+）的封閉效率在臨床上RSA中的診治價值。
　　目的:
　　1.通過觀察復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者免疫治療前后外周血中CD3+、CD4+和CD8+封閉效率的變化，了解免疫治療的效果。
　　2.分析免疫治療前后外周血中T淋巴細(xì)胞（CD3+、CD4+和CD8+）封閉效率與妊娠結(jié)局的關(guān)系，進(jìn)一步探討其在RSA中的診治價值。
　　資料與方法:
　　1、研究對象
　　2010年10月-2012年10

7、月就診于鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖中心，封閉抗體為陰性接受主動免疫治療的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者300例，其中放棄治療的有58例（因患者個人原因），隨訪失敗的有60例（因聯(lián)系方式更改），數(shù)據(jù)有效納入分析的有182例，年齡36±10歲，其中26-36歲89例，37-46歲93例。自然流產(chǎn)次數(shù)和例數(shù):6次24例，5次37例，4次34例，3次87例。
　　2、研究方法
　　對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者采用雙熒光標(biāo)記流式細(xì)胞分析技術(shù)，以患者丈夫（或與患者無

8、血緣關(guān)系健康男性）的淋巴細(xì)胞為抗原靶標(biāo)，測定患者外周血中T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率（如CD3+、CD4+和CD8+中有一項(xiàng)負(fù)值，則診斷為封閉抗體缺乏，納入治療范圍）。對接受治療的患者檢測其治療前、后外周血T淋巴細(xì)胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率，并對其治療后轉(zhuǎn)陽與未轉(zhuǎn)陽成功妊娠的結(jié)果進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì)分析。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
　　將相關(guān)變量進(jìn)行編碼后錄入Excel表格。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS1

9、7.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，如數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行分析;定量資料采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距進(jìn)行描述，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.RSA患者主動免疫治療后，外周血T細(xì)胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率高于治療前(P＜0.05)。
　　2.182例患者治療結(jié)局中未轉(zhuǎn)陽的患者與轉(zhuǎn)陽的患者CD3+、CD4+和CD8+治療前、后的值比較有顯著差異(P＜0.05)，且治療后轉(zhuǎn)陽的患者外

10、周血中CD3+、CD4+和CD8+的值高于治療后未轉(zhuǎn)陽的患者(P＜0.05)。
　　3.182例患者治療后未轉(zhuǎn)陽的有133例，妊娠且保胎成功的有22例;轉(zhuǎn)陽的有49例，妊娠且保胎成功的有15例。轉(zhuǎn)陽和未轉(zhuǎn)陽患者的妊娠后保胎成功率分別為:31％、17％(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.對RSA患者外周血CD3+、CD4+和CD8+封閉效率的檢測可成為評價免疫治療效果的有效指標(biāo)之一，在臨床上具有診治價值。