麻黃藥材的指紋圖譜研究及其生物堿含量測(cè)定研究.pdf

1、麻黃(HerbaEphedrae)屬于麻黃科植物，主要有草麻黃(EphedrasinicaStapJ)、中麻黃(Ephedraintermedia$chrenketC．A．Mey．)及木賊麻黃(EphedraequisetinaBge)。麻黃性溫、味辛、微苦，具發(fā)汗解表、宣肺平喘、利水消腫的功效。我國(guó)長(zhǎng)期以來一直是天然麻黃素的主要出口國(guó)，而目前的過度采收已使野生資源急劇減少。要保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定可控，有必要建立包含主要有效成分麻黃生物堿

2、的指紋圖譜。近年來，文獻(xiàn)報(bào)道的麻黃藥材HPLC指紋圖譜，未以麻黃生物堿為指標(biāo)。本文以麻黃生物堿為指標(biāo)建立麻黃藥材指紋圖譜，利于麻黃道地藥材的質(zhì)量控制。 麻黃藥材中發(fā)揮主要藥效的成分是六種生物堿。其中，麻黃堿(ephedrine，E)、偽麻黃堿(pseudoephedrine，PE)和甲基麻黃堿(methylephedrine，ME)含量高，且藥效強(qiáng)，是本文的主要研究成分。 隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，色譜分析法特別是高效液相色譜

3、法已經(jīng)在麻黃生物堿的檢測(cè)中占有越來越重要的地位。中國(guó)藥典2005年版一部采用高效液相色譜法對(duì)麻黃中的麻黃堿進(jìn)行了含量測(cè)定。目前，關(guān)于麻黃藥材中生物堿的HPLC含量測(cè)定法的文獻(xiàn)報(bào)道，均以麻黃堿和偽麻黃堿為檢測(cè)指標(biāo)。本文以麻黃堿、偽麻黃堿和甲基麻黃堿為檢測(cè)指標(biāo)，建立HI'LC含量測(cè)定方法，控制麻黃藥材的質(zhì)量。增加甲基麻黃堿檢測(cè)指標(biāo)，可更準(zhǔn)確、更科學(xué)地評(píng)價(jià)麻黃藥材的質(zhì)量。 目的： 1)以麻黃生物堿為主要指標(biāo)，建立麻黃藥材的HP

4、LC指紋圖譜，用于麻黃道地藥材的質(zhì)量控制。 2)建立同時(shí)測(cè)定麻黃藥材中麻黃堿、偽麻黃堿、甲基麻黃堿含量的HPLC法。 方法： 麻黃藥材HPLC指紋圖譜研究采用20％乙醇作提取溶劑；色譜柱：Phenomenexsynersi柱(250mmx4．6mm，4μm)；流動(dòng)相：0min-16min為乙腈一O．1％磷酸水溶液(含0．1％三乙胺)(2：98)，16min-80min為乙腈與O．1％磷酸水溶液梯度洗脫；柱溫：30

5、~C；流速：1．OmL．min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：0min-16rriin為210nm，16min-80min為350nm；進(jìn)樣量：20~．L。 同時(shí)測(cè)定麻黃藥材中三種生物堿含量的HPLC法以lm01．L-1鹽酸．20％乙醇溶液(1：lO)為提取溶劑；色譜柱：Phenomenexsynersi色譜柱(250mmx4．6mm，4μm)；流動(dòng)相：乙腈一0．02m01．L-1磷酸二氫鉀溶液(含O．2％三乙胺，磷酸調(diào)pH值2．7)(2：98

6、)；柱溫：300C；流速：1．OmL．min-I；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；進(jìn)樣量：20~．L。 結(jié)果： 麻黃藥材ilPLC指紋圖譜研究十個(gè)產(chǎn)地的麻黃藥材指紋圖譜相關(guān)系數(shù)依次為：0．9978、0．9990、0．9823、0．4310、0．9510、0．9981、0．9852、0．9913、0．4541、0．9698；夾角余弦依次為：0．9983、0．9993、0．9854．’0．5608、0．9640、0．9982、0．98

7、77、0．9936、0．5532、0．9738。各共有峰絕對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的RSD均分別小于O．3％和3％，結(jié)果顯示方法重復(fù)性良好，供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 同時(shí)測(cè)定麻黃藥材中三種生物堿含量的re'LC法鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿和鹽酸甲基麻黃堿分別在0．06gg-1．20~g(γ=0．9999)、0．03gg-0．60gg(γ=0．9997)和0．006gg~0．120pg(γ=0．9999)范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，線

8、性方程分別為Y=I873．520X-2．494、Y=2143．238X-26．4U和Y=1644．916X+O．151。平均回收率分別為97．5％(RSD=1．3％，n=6)、97．2％(RSD=I．1％，n=6)和96．8％(RSD=I．5％，n=6)。鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿和鹽酸甲基麻黃堿重復(fù)性試驗(yàn)的RSD分別為1．1％、1．3％和1．5％，結(jié)果顯示方法重復(fù)性良好，供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)論： 麻黃藥材IIPLC指紋