GH-IGFs對(duì)人子宮肌瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)的作用機(jī)理研究.pdf

1、目的：GH/IGFs參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，并影響著腫瘤的生物學(xué)行為，子宮肌瘤也表達(dá)GHR，同時(shí)已證實(shí)IGF-1和IGF-2是介導(dǎo)子宮肌瘤生長(zhǎng)的重要介質(zhì)，因此推測(cè)GH/IGFs在子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中可能具有一定作用。本試驗(yàn)通過(guò)觀察不同濃度rhGH、rhIGF-1及rhIGF-2對(duì)體外培養(yǎng)的子宮肌瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，及其對(duì)GHR mRNA和IGB-1R mRNA的調(diào)節(jié)，初步探討了GH、 IGF-1和IGF-2對(duì)子宮肌瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的

2、作用機(jī)理。 方法：采用酶消化法進(jìn)行子宮肌瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)26例，培養(yǎng)成功11例，5例進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)培養(yǎng)的肌瘤細(xì)胞60％匯合時(shí)加入不同濃度（空白、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml）的rhGH，rhIGF-1及rhIGF-2，作用48小時(shí)后（1）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況；（2）采用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期；（3）采用細(xì)胞原位雜交和圖像分析技術(shù)檢測(cè)GHR mRNA（rhGH）和IGF-1R mRNA（rhIGF-1

3、、rhIGF-2）表達(dá)的變化。 結(jié)果：1、GH、IGF-1和IGF-2對(duì)細(xì)胞增殖的影響：加激素48小時(shí)后發(fā)現(xiàn)GH10ng/ml，100ng/ml組、IGF-110ng/ml、100ng/ml組及IGF-2100ng/ml組，與對(duì)照組比較，細(xì)胞密度增加，GH組變化尤為明顯。與此一致，流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示，隨著GH、IGF-1濃度梯度的升高，S期細(xì)胞逐漸增多，而IGF-2組G2期的細(xì)胞數(shù)明顯增加，可見(jiàn)在體外GH、IGF-1及IGF-

4、2能夠促進(jìn)子宮肌瘤細(xì)胞的蛋白合成和有絲分裂。2、細(xì)胞原位雜交顯示：（1）10ng/ml和100ng/mlGH作用后，GHR mRNA表達(dá)明顯高于對(duì)照組（P<0.01），且隨著濃度的升高表達(dá)增強(qiáng)，表明10ng/ml及其以上濃度的GH對(duì)GHR mRNA的表達(dá)具有升調(diào)節(jié)作用，而且具有劑量依賴關(guān)系。（2）不同濃度IGF-1對(duì)肌瘤細(xì)胞IGF-1R mRNA表達(dá)的影響：對(duì)照組肌瘤細(xì)胞IGF-1R mRNA的表達(dá)較高，10ng/ml和100ng/ml

5、濃度的IGF-1作用后，IGF-1RmRNA表達(dá)均明顯低于對(duì)照組（p<0.01），而且IGF-1的濃度越高IGF-1RmRNA表達(dá)降低越明顯。（3）不同濃度IGF-2對(duì)肌瘤細(xì)胞IGF-1R mRNA表達(dá)的影響：1ng/ml組和10ng/ml組與對(duì)照組比較，IGF-1R mRNA表達(dá)無(wú)差異（P>0.05），但100ng/ml組IGF-1R mRNA表達(dá)明顯降低（p<0.01）。 結(jié)論：（1）GH、IGF-1及IGF-2能夠促進(jìn)子宮