丁酸鈉抑制人子宮內(nèi)膜癌細胞生長及其作用機制的研究.pdf

1、山東大學博士研究生論文丁酸鈉抑制人子宮內(nèi)膜癌細胞生長及其作用機制的研究丁酸鈉抑制人子宮內(nèi)膜癌細胞生長及其作用機制的研究論文I博士研究生專業(yè)博士生導師榮風年婦科腫瘤湯春生教授中文摘要丁酸鈉對人子宮內(nèi)膜癌細胞系HHUA生長的影響目的探討丁酸鈉(NaB)對人子宮內(nèi)膜癌細胞系HHUA細胞生長的影響。方法以不同濃度NaB處理體外培養(yǎng)的HHUA細胞1O72h，應用形態(tài)學、DNA熒光染色、流式細胞儀、瓊脂糖凝膠電泳等方法檢測細胞凋亡及細胞周期分布。結

2、果NaB能誘導HHUA細胞凋亡和細胞周期G1期阻滯。各種濃度的NaB處理細胞后24h，70％以上的細胞被阻滯在Gl期；以濃度為4mol／L和10mol／L處理后24h，出現(xiàn)典型的凋亡細胞，瓊脂糖凝膠電泳顯示清晰的DNALadder，SubGl百分率隨用藥時間延長或藥物濃度增加而增高(P10mol／L)則引起細胞壞死。誘導細胞周期G1期阻滯和細胞凋亡是NaB抑制HHUA細胞生長的重要機制。關鍵詞丁酸鈉；子宮內(nèi)膜癌細胞系；細胞周期阻滯；細胞

3、凋亡山東大學博士研究生論文丁酸鈉抑制人子宮內(nèi)膜癌細胞生長及其作用機制的研究論文II丁酸鈉抑制HHUA細胞生長的分子機制研究目的研究NaB誘導HHUA細胞G1期阻滯和細胞凋亡的分子機制。方法應用不同濃度(Omol／L、2m01／L、4m01／L、10m01／L)的NaB處理體外培養(yǎng)的HHUA細胞，收集細胞、用RIPA緩沖液制備細胞抽提液。用WesternBlot分析測定p53、p21、pRb、E2F1、PCNA、Fas、Bax、Bcl2、

4、PARP、LaminB和caspase3蛋白的表達情況。研究Caspase3抑制劑AcDEVDCHO對細胞凋亡的影響，先用AcDEVDCHO處理細胞2h再加入NaB，然后測定SubGl百分率、DNALadder、PARP蛋白表達情況。結果NaB能增加p21蛋白的表達、促進pRb去磷酸化、降低p53蛋白和E2F1蛋白的表達。用終濃度為2mol／L的NaB處理細胞后lObp21蛋白表達水平增強、24hpRb去磷酸化、p53蛋白和E2FI蛋白

5、表達水平降低；4mol／L處理后24h能誘導Fas蛋白過度表達、激活caspase3、切割PARP和LaminB蛋白。Caspase一3抑制劑能降低85kDPARP蛋白的表達水平和SubGl百分率。結論NaB通過誘導p21蛋白過度表達及pRb去磷酸化，下調(diào)E2F1蛋白表達而誘導細胞周期G1期阻滯。NaB誘導的細胞凋亡與Fas蛋白過度表達及caspase3活化有關，而與p53蛋白、Bax蛋白、Bcl一2蛋白表達無關。本研究結果提示NaB有