周期素依賴性蛋白激酶5對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化及腦發(fā)育作用的研究.pdf

1、周期素依賴性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase, CDK5)作為CDKs家族的成員之一,是上世紀(jì)90年代初才發(fā)現(xiàn)的一個(gè)多功能的蛋白質(zhì).研究證實(shí)CDK5主要通過(guò)對(duì)不同的信號(hào)傳導(dǎo)通路上靶蛋白的磷酸化來(lái)參與腦發(fā)育早期神經(jīng)細(xì)胞的遷移、軸突生長(zhǎng)等重要發(fā)育事件的調(diào)節(jié).神經(jīng)胚形成(neurulation)是神經(jīng)系統(tǒng)早期發(fā)育的重要事件,其組織、細(xì)胞、特別是分子機(jī)制的研究是當(dāng)今發(fā)育神經(jīng)生物學(xué)的一個(gè)熱點(diǎn)領(lǐng)域.近年來(lái)人們認(rèn)識(shí)到胚胎早期

2、神經(jīng)管的神經(jīng)上皮中存在著大量能夠增殖分化的多潛能的神經(jīng)前體細(xì)胞即神經(jīng)干細(xì)胞.從基因水平而言,神經(jīng)管關(guān)閉的過(guò)程是一系列基因按高度特異的時(shí)空模式表達(dá)與相互作用的結(jié)果;眾多遺傳或環(huán)境因素的改變均可導(dǎo)致包括神經(jīng)管缺陷(neural tube defect,NTD)在內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)的畸形.NTD的發(fā)生與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、細(xì)胞的粘附分子、神經(jīng)細(xì)胞的遷移等有關(guān)的分子信號(hào)的改變或作用途徑被阻斷密

3、切相關(guān).但迄今涉及上述過(guò)程的基因與具體的調(diào)控途徑均知之甚少,對(duì)CDK5在腦發(fā)育早期的變化規(guī)律及其對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的分化作用的相關(guān)報(bào)道目前尚少.因此,該研究選用正常及喂服過(guò)量維甲酸(retinoic acid,RA)誘導(dǎo)小鼠NTD發(fā)生模型,采用整體全胚胎原位分子雜交和免疫熒光染色、半薄切片染色、DNA芯片、腦片原位分子雜交和免疫組化染色、細(xì)胞培養(yǎng)、基因轉(zhuǎn)染等技術(shù);結(jié)合流式細(xì)胞檢測(cè)、激光共聚焦顯微鏡觀察、圖像分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析等手段,探討了神經(jīng)上