6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌Hep G2細胞凋亡研究.pdf_第1頁
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1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文6,8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細胞凋亡研究姓名:夏紅申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:曹建國2007050136,8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細胞凋亡研究6,8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細胞凋亡研究中文摘要中文摘要目的目的:觀察68二三氟甲基7乙酰氧基白楊素(dFMAChR)抑制體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞的

2、生長和誘導(dǎo)凋亡作用;用人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治療實驗評價dFMAChR在體抗肝癌的有效性;并初步探討其抗肝癌作用機制,為尋找具有開發(fā)前景的肝癌治療活性新化學(xué)實體提供理論和實驗依據(jù)。方法方法:MTT比色法測定dFMAChR對體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞和人胚肝L02細胞增殖的影響,評價其對人肝癌細胞作用選擇性;平皿克隆形成法及軟瓊脂克隆形成法檢測dFMAChR對體外培養(yǎng)HepG2細胞的錨定依賴性及非錨定依賴性生長能力的影響;Hoe

3、chst染色熒光顯微鏡觀察dFMAChR誘導(dǎo)人肝癌HepG2細胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變;PI染色流式細胞計定量分析(FCM)法檢測dFMAChR對HepG2細胞誘導(dǎo)凋亡程度;DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測dFMAChR誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡的典型DNA“梯形”條帶;建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型,評價dFMAChR在體的抗肝癌活性;HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察人肝癌移植瘤組織形態(tài)學(xué)變化;TUNEL法檢測dFMAChR誘導(dǎo)人肝癌裸鼠移植瘤細胞凋亡作用

4、;應(yīng)用Westernblot檢測dFMAChR對HepG2細胞凋亡相關(guān)蛋白PPARγ、NFκB、Bcl2、Bax、Caspase3表達和活性的影響。結(jié)果:結(jié)果:MTT比色法結(jié)果顯示,dFMAChR(3.0、10.0、30.0M)和其先導(dǎo)化合物白楊素(ChR30.0M)及陽性對照藥物氟尿嘧啶(5FU30.0M)分別處理人肝癌HepG2細胞48小時,其增殖相對抑制率分別為30.84%54.04%62.26%,52.35%和61.48%;dF

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