6，8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導人肝癌Hep G2細胞凋亡研究.pdf

1、南華大學碩士學位論文6，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導人肝癌HepG2細胞凋亡研究姓名：夏紅申請學位級別：碩士專業(yè)：藥理學指導教師：曹建國2007050136，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導人肝癌HepG2細胞凋亡研究6，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導人肝癌HepG2細胞凋亡研究中文摘要中文摘要目的目的：觀察68二三氟甲基7乙酰氧基白楊素(dFMAChR)抑制體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞的

2、生長和誘導凋亡作用；用人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治療實驗評價dFMAChR在體抗肝癌的有效性；并初步探討其抗肝癌作用機制，為尋找具有開發(fā)前景的肝癌治療活性新化學實體提供理論和實驗依據(jù)。方法方法：MTT比色法測定dFMAChR對體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細胞和人胚肝L02細胞增殖的影響，評價其對人肝癌細胞作用選擇性；平皿克隆形成法及軟瓊脂克隆形成法檢測dFMAChR對體外培養(yǎng)HepG2細胞的錨定依賴性及非錨定依賴性生長能力的影響；Hoe

3、chst染色熒光顯微鏡觀察dFMAChR誘導人肝癌HepG2細胞凋亡的形態(tài)學改變；PI染色流式細胞計定量分析（FCM）法檢測dFMAChR對HepG2細胞誘導凋亡程度；DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測dFMAChR誘導HepG2細胞凋亡的典型DNA“梯形”條帶；建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型，評價dFMAChR在體的抗肝癌活性；HE染色光學顯微鏡下觀察人肝癌移植瘤組織形態(tài)學變化；TUNEL法檢測dFMAChR誘導人肝癌裸鼠移植瘤細胞凋亡作用

4、；應用Westernblot檢測dFMAChR對HepG2細胞凋亡相關蛋白PPARγ、NFκB、Bcl2、Bax、Caspase3表達和活性的影響。結果：結果：MTT比色法結果顯示，dFMAChR(3.0、10.0、30.0M)和其先導化合物白楊素(ChR30.0M)及陽性對照藥物氟尿嘧啶(5FU30.0M)分別處理人肝癌HepG2細胞48小時，其增殖相對抑制率分別為30.84%54.04%62.26%，52.35%和61.48%；dF