黃芩素抗抑郁作用與酸敏感離子通道在抑郁癥發(fā)病機制中的作用.pdf

1、第一部分黃芩素抗抑郁作用及其機制
　　 目的：抑郁癥是僅次于心腦血管疾病的第二大精神類疾病，嚴重影響人們的正常生活質量。抑郁癥的發(fā)病機制十分復雜，以往的研究多集中于經典單胺類神經遞質在抑郁癥中的作用，目前從增加神經生長因子表達和神經保護角度來研究抗抑郁作用倍受關注。黃芩素是傳統(tǒng)中藥黃芩的重要成分之一，其化學成分以黃酮類為主，現(xiàn)已有研究表明，黃酮類中藥通過神經保護機制等改善抑郁癥狀。但黃芩素是否也有同樣效果，尚未見報道。本研究旨在

2、通過建立抑郁癥動物模型，將行為學和分子生物學方法相結合，探討黃芩素抗抑郁的作用及其機制。
　　 方法：通過急性和慢性給藥方法，采用小鼠懸尾、小鼠強迫游泳、大鼠強迫游泳，大鼠敞箱實驗的行為學實驗，觀察黃芩素對抑郁癥動物模型的行為學作用；采用免疫組織化學觀察神經生長因子（NGF）表達變化；采用放射性免疫試劑盒觀察血清中皮質醇含量變化；采用免疫印跡（western blotting）觀察NGF 信號下游通路細胞外信號調節(jié)激酶（ERK）

3、的表達，及蛋白激酶A、蛋白激酶C的表達；采用高效液相電化學方法，測定腦內單胺類遞質的含量變化。
　　 結果：急性給予1、2、4 mg/kg 黃芩素均可降低小鼠懸尾和強迫游泳的不動時間，連續(xù)給藥7 d 也可降低大鼠強迫游泳不動時間。慢性不可預測應激模型大鼠給予黃芩素21d后，可降低大鼠強迫游泳的不動時間，且呈濃度依賴性關系。在敞箱實驗（OFT）中，可改善大鼠水平和垂直得分。同時，黃芩素降低血清中皮質激素的水平，增加海馬齒狀回NGF

4、的表達，增加蛋白激酶C、蛋白激酶A、磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶的表達，并提高腦中單胺類遞質含量。
　　 結論：黃芩素具有抗抑郁癥作用，該作用可能與提高海馬齒狀回NGF的表達，增強NGF 信號通路，同時改善單胺類遞質含量等有關。
　　 第二部分酸敏感離子通道在抑郁癥發(fā)病機制中的作用
　　 目的：近年來，抗抑郁癥藥物研究除了以增高腦內單胺類神經遞質，提高海馬齒狀回神經元再生等作為研究靶點外，對于離子通道與抑郁癥的關系受

5、到越來越多的關注。其中酸敏感離子通道（acid-sensing ion channels，ASICs）在精神疾病中的作用已成為研究熱點之一，它與驚恐和腦缺血都有十分緊密的聯(lián)系。因此，本研究旨在探討抑郁癥時ASIC的變化，為抗抑郁癥藥物研究提供新的靶點。
　　 方法：建立不同時間點的大鼠慢性應激模型，采用免疫印跡（western blotting）法，觀察應激對大鼠海馬區(qū)ASICs蛋白表達的變化。采用放射性免疫試劑盒，觀察應激前后

6、血清中皮質醇含量的改變；給予不同濃度和時間的皮質醇，采用western blotting 觀察培養(yǎng)大鼠海馬神經元ASICs蛋白表達的變化。
　　 結果：慢性應激1天、1周和4周，ASIC1蛋白表達逐漸增高，在第4周最為明顯。應激4周后皮質醇含量亦增高。0.1、1、10、100 μM 皮質醇孵育海馬神經元12 h，濃度依賴性地增加ASIC1表達。10 μM 皮質醇孵育海馬神經元12、24 h 可時間依賴性地增加ASIC1蛋白表達。