FTY720對人胰腺癌Miopac2細胞增殖和凋亡的作用研究.pdf

1、密級：學位類別：科學學位√專業(yè)學位口學號：20062072又肄普科^垮TlAN’|INMEDICALUNlVERSllY碩士學位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目：FTY720對人胰腺癌Miopac2細胞增殖和凋亡的作用研究TITLETheeffectofFTY720onproliferationandapoptosisinpancreaticcancerMiopac2cells一級學科：藥學二級學科：藥理學論文作者：

2、王瑞指導教師：何景華天津醫(yī)科大學研究生院二oo九年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的：新型免疫抑制劑FTY720是從冬蟲夏草中得到的提取物，當前的研究顯示它也可能是一種有效的腫瘤抑制劑。因此，本實驗探討FTY720對人胰腺癌Miopac2細胞的增殖抑制作用和誘導Miopac2細胞凋亡及其機制，為其能在臨床治療胰腺癌等惡性腫瘤提供實驗依據(jù)。方法：1四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法繪制人胰腺癌Miopac2細胞生長曲線。2體外培養(yǎng)人胰腺

3、癌Miopac2細胞，實驗分為空白對照組、FTY720處理組(濃度分別為125、25、5、10、20pg／m1)和陽性對照組(阿霉素2Itg／m1)。3FTY720分別處理12h、24h、48h和72h后，MTT法檢測Miopac2細胞生長抑制率和半數(shù)抑制濃度(IC50)值。4藥物處理24h后，光學顯微鏡觀察細胞形態(tài)的變化。5藥物處理24h后，熒光顯微鏡觀察細胞凋亡的變化。6藥物處理24h后，DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA條帶(DNAL

4、adder)。7藥物處理24h后，流式細胞儀檢測細胞周期、凋亡率的變化。8藥物處理24h后，羅丹明123染色檢測細胞線粒體膜電位的變化。9藥物處理24h后，WesternBlot檢測bcl一2蛋白表達的變化。10藥物處理24h后，分光光度法檢測caspase一9、caspase3蛋白表達變化。結(jié)果：1人胰腺癌Miopac2細胞的對數(shù)生長期出現(xiàn)在細胞接種后的第26天。2FTY720對Miopac2細胞增殖有較強的抑制作用，且這種作用呈一定

5、的劑量和時間依賴性。125、25、5、10、20Itg／mlFTY720和2g／“阿霉素處理Miopac2細胞12h的細胞抑制率分別為(21240044)％、(1079610030)％、(428320085)％、(69735士0021)％、(729203：0027)％和(S89380051)％；處理24h的細胞抑制率分別為(48393：0021)％、(15249士0029)％、(599710050)％、(80938士0009)％、(81