鞣花酸對(duì)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　觀察鞣花酸對(duì)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響，并探討其可能的作用機(jī)制，為鞣花酸的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　(1)體外培養(yǎng)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞24h后，加入終濃度為0μ g/ml（陰性對(duì)照組）、2μ g/ml、4μ g/ml、6μ g/ml、8μ g/ml的鞣花酸作用于細(xì)胞24h、48h、72h后，倒置顯微鏡觀察各加藥組細(xì)胞形態(tài)的變化，MTT法測定不同濃度組鞣花酸對(duì)細(xì)胞增殖的影響。<

2、br>　　(2)體外培養(yǎng)人胰腺癌PANC-1細(xì)胞24h后，加入終濃度為0μg/ml（陰性對(duì)照組）、2μ g/ml、4μ g/ml、6μ g/ml的鞣花酸作用于細(xì)胞24h、48h、72h后:①Hoechst33258熒光染色法觀察不同濃度組鞣花酸對(duì)細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)影響。②AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測各濃度組鞣花酸對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響。③PI法檢測各濃度組鞣花酸對(duì)細(xì)胞周期的影響。④Western blot法檢測不同濃度組鞣花酸對(duì)

3、細(xì)胞COX-2和NF-κB(p65)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　(1)倒置顯微鏡下觀察:隨著鞣花酸藥物濃度的增加和作用時(shí)間的延長，PANC-1細(xì)胞變圓、皺縮、碎裂，培養(yǎng)板中脫落細(xì)胞逐漸增多，貼壁細(xì)胞逐漸減少。MTT法結(jié)果顯示:鞣花酸對(duì)PANC-1細(xì)胞的增殖抑制作用隨著藥物濃度的增加和作用時(shí)間的延長而逐漸增強(qiáng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(2)①Hoechst33258熒光染色法結(jié)果顯示:隨著鞣花酸藥

4、物濃度的增加和作用時(shí)間的延長，PANC-1細(xì)胞的數(shù)量逐漸減少，且核固縮、破裂的細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞的數(shù)量逐漸增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。②AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法結(jié)果顯示:鞣花酸可顯著地促進(jìn)PANC-1細(xì)胞凋亡，且呈明顯的時(shí)間和濃度依賴趨勢，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③PI法結(jié)果顯示:鞣花酸可誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞發(fā)生G1期阻滯，且呈明顯的時(shí)間和濃度依賴趨勢，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④West