靶向PLGA-COOH超聲造影劑的制備及體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文對(duì)靶向PLGA-COOH超聲造影劑的制備及體外尋靶進(jìn)行了研究。本研究分兩部分：
　　 第一部分：
　　 目的：采用共價(jià)結(jié)合的方法制備靶向高分子超聲造影劑,并考察其體外尋靶能力。
　　 方法：⑴以羧基端乳酸/羥基乙酸共聚物(PLGA-COOH)為成膜材料,采用雙乳化法和冷凍干燥技術(shù)制備高分子材料PLGA-COOH超聲造影劑；以普通光學(xué)顯微鏡觀察其形態(tài)、大小分散度情況,馬爾文激光粒度儀檢測(cè)其粒徑及分布。⑵采用ED

2、C/NHS[1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺]作為偶聯(lián)活性劑,以碳二亞胺法將PLGA-COOH超聲造影劑表面上的羧基與人肝癌Hab18單克隆抗體上的氨基共價(jià)結(jié)合,制備靶向高分子超聲造影劑；采用光學(xué)顯微鏡及激光共聚焦觀察該靶向高分子超聲造影劑與肝癌細(xì)胞7721在體外的尋靶結(jié)合能力。
　　 結(jié)果：①采用本方法制備的PLGA-COOH超聲造影劑,外觀為白色粉末狀物質(zhì),平均粒徑約(635.5±55)nm。微

3、泡水溶性好,生理鹽水復(fù)溶后普通光學(xué)顯微鏡觀察,其形態(tài)規(guī)則、呈球形,表面光滑,大小均勻,分散度好,微泡間無(wú)明顯粘連、聚集現(xiàn)象；②體外尋靶試驗(yàn)顯示,該靶向高分子超聲造影劑與普通PLGA-COOH造影劑對(duì)照能聚集并牢固結(jié)合到肝癌7721細(xì)胞表面。
　　 結(jié)論：采用碳二亞胺法,通過(guò)共價(jià)結(jié)合的方式,成功制備出靶向PLGA-COOH超聲造影劑,該靶向造影劑在體外具有較強(qiáng)的特異性尋靶結(jié)合能力。
　　 第二部分：
　　 目的：將

4、鏈酶親和素以共價(jià)結(jié)合的方式連接在PLGA-COOH超聲造影劑表面,通過(guò)與生物素化抗體結(jié)合,制備靶向PLGA-COOH超聲造影劑,并考察其體外尋靶結(jié)合能力。
　　 方法：采用EDC/NHS[1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺]作為偶聯(lián)活性劑,以碳二亞胺法將PLGA-COOH超聲造影劑表面上的羧基與鏈酶親和素上的氨基共價(jià)結(jié)合,制備表面連接鏈酶親和素的PLGA-COOH超聲造影劑。采用紅外與免疫熒光檢測(cè)鏈酶

5、親和素與PLGA-COOH超聲造影劑連接的情況。將生物素化人肝癌Hab18單克隆抗體與連接鏈酶親和素的PLGA-COOH超聲造影劑結(jié)合,制備靶向高分子超聲造影劑；采用光學(xué)顯微鏡及激光共聚焦觀察該靶向高分子超聲造影劑與肝癌細(xì)胞7721在體外的尋靶結(jié)合能力。
　　 結(jié)果：紅外與免疫熒光檢測(cè)顯示鏈酶親和素通過(guò)共價(jià)鍵成功的連接在高分子造影劑上,并存在活性。體外尋靶試驗(yàn)顯示靶向PLGA-COOH超聲造影劑與普通PLGA-COOH超聲造影劑