2型糖尿病大鼠腦組織TIPE2和TNFAIP8的表達(dá)特征及其與Aβ1-40沉積的相關(guān)性.pdf

1、目的：腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8樣因子2(tumor necrosis factor-αinduced protein-8-like-2，TIPE2)和腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8(tumornecrosis factor-α induced protein-8，TNFAIP8)屬于TNFAIP8家族成員，是近年新發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)，它們能夠負(fù)性調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和細(xì)胞凋亡，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。糖尿病腦血管病具有發(fā)病率高、卒中預(yù)后差的特點(diǎn);糖尿病能夠顯著

2、促進(jìn)阿爾茨海默病的病程進(jìn)展，嚴(yán)重危害人類(lèi)生命健康和生活質(zhì)量。目前研究認(rèn)為，高血糖本身和糖尿病誘導(dǎo)的淀粉樣蛋白Aβ1-40沉積均可以誘導(dǎo)腦組織炎癥水平增高，免疫反應(yīng)介導(dǎo)的炎癥損傷和細(xì)胞凋亡在糖尿病腦組織損傷中發(fā)揮重要作用，但其具體機(jī)制尚不明確。因此，探討高血糖誘導(dǎo)的腦內(nèi)炎癥反應(yīng)過(guò)程，對(duì)于理解糖尿病腦損傷的發(fā)病機(jī)制具有重要意義。為此，本課題主要目的是通過(guò)觀(guān)察TIPE2和TNFAIP8在2型糖尿病大鼠腦組織中的表達(dá)特征及其與Aβ1-40沉積的

3、相關(guān)性，初步探討TIPE2和TNFAIP8是否參與糖尿病腦組織損傷的發(fā)生發(fā)展。
　　 方法：
　　 (1)采用自發(fā)性2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki rat，GK rat)大鼠為2型糖尿病動(dòng)物模型(GK組)，Wistar大鼠為非糖尿病動(dòng)物模型(Control組);每組8只大鼠。
　　 (2)運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)腦組織TIPE2、TNFAIP8和Aβ1-40的表達(dá)及空間分布;RT-PCR、Weste

4、rn blot法分別檢測(cè)腦組織TIPE2和TNFAIP8的mRNA水平和蛋白含量;ELISA法檢測(cè)腦組織Aβ1-40蛋白含量。
　　 (3)所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，采用SPSS17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)和兩變量間Person相關(guān)性分析，P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 (1) TIPE2主要表達(dá)于皮層和皮層下組織結(jié)構(gòu)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和微/小血管管壁。與Control

5、組相比，GK組大鼠腦組織TIPE2蛋白、mRNA、陽(yáng)染血管數(shù)和陽(yáng)染神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)均顯著增高（P均＜0.05）。
　　 (2) TNFAIP8主要分布于皮層和皮層下組織結(jié)構(gòu)的神經(jīng)元和血管管壁。與Control組相比，GK組大鼠腦組織TNFAIP8蛋白、mRNA、陽(yáng)染血管數(shù)和陽(yáng)染神經(jīng)細(xì)胞數(shù)均顯著增高（P均＜0.05）。
　　 (3)Aβ1-40主要分布于皮質(zhì)和海馬等組織結(jié)構(gòu)的神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和血管壁。與Control組相

6、比，GK組大鼠腦組織Aβ1-40蛋白、陽(yáng)染血管數(shù)和陽(yáng)染細(xì)胞數(shù)均顯著增高（P均＜0.05）。
　　 (4)腦組織TIPE2蛋白表達(dá)與Aβ1-40蛋白水平在Control組(r=0.814)和GK組(r=0.744)均呈正相關(guān)（P均＜0.05）。
　　 (5)腦組織TNFAIP8蛋白表達(dá)與Aβ1-40蛋白水平在Control組(r=0.739)和GK組(r=0.756)均呈正相關(guān)（P均＜0.05）。
　　 結(jié)論：

7、r>　　 (1)正常大鼠腦組織TIPE2和TNFAIP8呈低水平表達(dá)，提示TIPE2和TNFAIP8可能參與維持正常腦組織損傷內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。
　　 (2)糖尿病誘導(dǎo)大鼠腦組織TIPE2和TNFAIP8表達(dá)增多，提示TIPE2和TNFAIP8可能參與減輕糖尿病腦組織炎癥損傷。
　　 (3)糖尿病大鼠腦組織TIPE2和TNFAIP8表達(dá)均與Aβ1-40沉積呈正相關(guān)，提示糖尿病誘導(dǎo)的Aβ1-40沉積可能啟動(dòng)反饋調(diào)節(jié)通路，上調(diào)T