2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、丙型肝炎病毒的基因組是一條9.4kb的單股正鏈RNA分子.HCV-NS4A編碼二個(gè)病毒多肽:NS4A和NS4B.HCV-NS4A蛋白作為一種非結(jié)構(gòu)形式,主要的生物學(xué)功能是作為NS3絲氨酸蛋白酶的輔助因子,在HCV多蛋白的成熟過(guò)程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用;NS4B的功能目前尚無(wú)確切資料.我們克隆了NS4區(qū)部分基因,進(jìn)行了表達(dá)、純化,研究了NS4抗原的作用特點(diǎn).該課題分以下三部分進(jìn)行:第一部分:丙型肝炎病毒NS4片段的克隆:以HCV-J質(zhì)粒為

2、模板,設(shè)計(jì)引物,經(jīng)PCR擴(kuò)增獲取NS4基因片段(4U4D);將PCR產(chǎn)物克隆到PMD18-T中,再將該片段用BamHI和KpnI雙酶切定向克隆到PQE30載體中,構(gòu)建PQE30-4U4D重組質(zhì)粒.經(jīng)酶切、測(cè)序鑒定,目的基因克隆結(jié)果正確.第二部分:丙型肝炎病毒Ns4基因片段的原核表達(dá)與純化:將PQE30-4U4D重組質(zhì)粒導(dǎo)入M15菌,培養(yǎng)、IPTG誘導(dǎo)、離心、收集菌體、超聲粉碎、粗純化,12％SDS-PAGE對(duì)培養(yǎng)物分析表達(dá)相對(duì)分子量Mr

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