辣椒疫霉消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)分子檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用.pdf

1、辣椒疫病是一種世界性病害，于1922年在美國(guó)最早發(fā)現(xiàn)。我國(guó)自1978年發(fā)現(xiàn)此病以來(lái)，至今己蔓延到新疆、甘肅、青海、江西、北京、云南、浙江、上海以及廣東等地區(qū)，并有逐年加重的趨勢(shì)。一般死株率為15％-30％，嚴(yán)重時(shí)高達(dá)50％-60％甚至毀種。同時(shí)，在美國(guó)、加拿大等國(guó)家發(fā)生嚴(yán)重，均造成不同程度的損失。 辣椒疫病也是我省辣椒種植過(guò)程中普遍發(fā)生的一種根莖病害，部分地塊可引起絕產(chǎn)，嚴(yán)重影響著辣椒的產(chǎn)量和品質(zhì)。但是目前對(duì)此病害進(jìn)行的傳統(tǒng)藥劑

2、防治，具一定的盲目性，常因藥劑未噴施于病菌最活躍的發(fā)病部位，或者錯(cuò)過(guò)有效的防治時(shí)期，導(dǎo)致病情加重甚至產(chǎn)生藥害，并且盲目過(guò)多的施用化學(xué)藥劑造成資源浪費(fèi)。為了使研究體現(xiàn)系統(tǒng)性并具一定的深度，本研究在扎實(shí)的前期研究積累的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了辣椒疫霉特異引物制備及其分子檢測(cè)、辣椒疫霉群體遺傳多樣性、辣椒疫霉致病性分化及抗病材料篩選等研究。在此基礎(chǔ)上，本研究對(duì)山東濰坊、德州、泰安、濟(jì)南等地市辣椒疫霉病發(fā)生危害現(xiàn)狀進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，實(shí)地采集病株和病田土樣，優(yōu)

3、化了土壤辣椒疫霉分離技術(shù)。幾大主要辣椒種植區(qū)進(jìn)行了系統(tǒng)病株標(biāo)本采集，獲得了大量的辣椒病株標(biāo)本和土壤標(biāo)樣，經(jīng)室內(nèi)分離純化，積累了大量的來(lái)自不同生態(tài)環(huán)境的辣椒疫霉菌株。本研究結(jié)合土傳辣椒疫霉所導(dǎo)致的辣椒疫病發(fā)病急、蔓延快、危害重和成片死的特點(diǎn)，提出利用分子雜交技術(shù)對(duì)土壤和辣椒寄主內(nèi)辣椒疫霉消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)進(jìn)行早期分子診斷的觀點(diǎn)，指導(dǎo)菜農(nóng)對(duì)該病害適時(shí)進(jìn)行早期防治，將病害控制于發(fā)病源頭。征集辣椒疫霉菌株，PCR克隆測(cè)序，制備特異引物，構(gòu)建適宜的反應(yīng)技術(shù)

4、體系并驗(yàn)證引物的特異性，結(jié)合辣椒疫病危害特點(diǎn)和菜農(nóng)急待解決該問(wèn)題的迫切性，將其用于對(duì)土壤辣椒疫霉和辣椒寄主體內(nèi)疫霉活動(dòng)特性的分子診斷。該研究結(jié)果可為辣椒疫病的有效防治提供理論依據(jù)，并希望應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐，適時(shí)采取防治措施，挽回因辣椒疫病大發(fā)生造成的經(jīng)濟(jì)損失。 本研究通過(guò)對(duì)辣椒疫霉遺傳多樣性研究，在初步探索辣椒疫霉群體遺傳學(xué)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探索了辣椒疫霉致病性遺傳分化、土壤一寄主辣椒疫霉遺傳演化關(guān)系的分子機(jī)理，為深入開(kāi)展該類病原菌分