大豆疫霉侵染早期機制的分子解析.pdf

1、分類號墜絲：!學號2嫂絲QZ絲i南京愛鼉戈蓬博士學位論文大豆疫霉侵染早期機制的分子解析陳孝仁指導(dǎo)教師嫠壘菠一越攔專業(yè)名稱蕉塑瘟壅堂研究方向墓苴速盞盞坌壬壘塑雯答辯日期。三莖蔓土生盎且博士學位論文大豆疫霉侵染早期機制的分子解析應(yīng)對寄主和環(huán)境壓力，并且避免被寄主識別因此，本研究首先分析了大豆疫霉與寄主大豆、非寄主番茄和中國不結(jié)球小青菜互作早期雙方的表型。結(jié)果揭示大豆疫霉在與植物互作早期菌絲尖端均發(fā)生變細變長，寄主和非寄主則發(fā)生活性氧的迸發(fā)。

2、模擬自然條件下大豆疫霉應(yīng)答氧化壓力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在lmM的過氧化氫終濃度下，游動孢子迅速休止，并且在觀察的10h內(nèi)沒有萌發(fā)；而在03mM的過氧化氫終濃度下，游動孢子的萌發(fā)率高于對照，并且芽管的長度長于對照提示過氧化氫在游動孢子識別寄主、萌發(fā)和侵入中可能起著重要作用游動孢子在大豆葉片，下胚軸和根部均產(chǎn)生明顯的附著胞或類似附著胞結(jié)構(gòu)大豆與大豆疫霉互作相關(guān)的氧化壓力反應(yīng)重點研究了大豆與大豆疫霉互作早期大豆體內(nèi)活性氧的代謝活動。利用分光光度法分析了

3、兩種不同抗性水平的大豆在與大豆疫霉互作中活性氧的迸發(fā)，寄主細胞死亡、脂質(zhì)過氧化程度、抗氧化酶(過氧化氫酶和谷胱甘肽還原酶)和非酶促抗氧化劑(抗壞血酸和谷胱甘膚)的含量變化。而且，利用染色法對寄主活性氧迸發(fā)和細胞死亡進行了研究；分析了互作中大豆葉片致病防衛(wèi)相關(guān)基因的表達變化及外源施用還原劑對互作的影響。結(jié)果表明，在接種后，抗病品種(南農(nóng)4931)和感病品種(合豐35)均發(fā)生了活性氧迸發(fā)受大豆疫霉菌侵染后，大豆各品種都產(chǎn)生了細胞的死亡；丙二

4、醛含量變化趨勢與品種抗性呈負相關(guān)；在接種后3h內(nèi)，不同抗性品種體內(nèi)過氧化氫酶和谷胱甘肽還原酶比活性均上升大豆疫霉侵染大豆誘導(dǎo)大豆Pgs(pathogenesisrelatedproteingenes，P腳基因的上調(diào)表達，在南農(nóng)4931中上調(diào)表達時間早于合豐35，持續(xù)時間也長于后者；外源施用三種還原劑DTT、glutathionc，ascorbate均有助于大豆疫霉菌的侵染結(jié)果表明，活性氧代謝可能在大豆與大豆疫霉菌互作中起著重要作用大豆疫

5、霉侵來早期謗導(dǎo)表達基因的篩選為探究大豆疫霉致病性的分子機制，利用抑制性差減雜交方法篩選大豆疫霉侵染大豆早期誘導(dǎo)表達基因，建立了一個大豆疫霉侵染早期誘導(dǎo)表達cDNA文庫該文庫包含73個單基因，其中66個在大豆疫霉基因組數(shù)據(jù)庫具有同源序列，7個沒有同源序列這些基因涉及蛋白合成、能量代謝，細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞壁建成和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等途徑這些結(jié)果為了解大豆疫霉早期侵染大豆過程中差異表達的基因以及卵茵的致病機理提供了依據(jù)大豆疲霉c2112型鋅指蛋白基因的