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文檔簡介
1、目的:近年來研究顯示腎間質(zhì)病變與慢性腎功能衰竭進展關(guān)系密切,比腎小球病變更能預(yù)測預(yù)后,腎間質(zhì)纖維化幾乎是各種腎臟疾病進展到終末期腎衰竭的共同途徑和主要病理基礎(chǔ)。其發(fā)病機制十分復(fù)雜,目前尚不完全清楚,但其過程涉及細胞、細胞外基質(zhì)、細胞因子和黏附分子及其之間的相互作用。目前研究較多的有轉(zhuǎn)化生長因子(transforming.growth factor,TGF)、結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor
2、,CTGF)、肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)及各型膠原(collagen)等。中醫(yī)藥治療腎臟疾病在我國有著悠久的歷史,其中益氣活血降濁是應(yīng)用較為廣泛的方法之一。腎康注射液是治療慢性腎功能衰竭的一種復(fù)方中藥,目前對其延緩腎小球硬化方面的研究較多,但與腎間質(zhì)纖維化方面的研究較少。本課題通過研究CTGF、HGF在單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)模型大鼠腎間質(zhì)的表達及腎康注射液與苯那普利應(yīng)用對其表達的影響,來
3、探討腎間質(zhì)纖維化發(fā)生的可能機制并為臨床進行。腎間質(zhì)纖維化防治提供理論依據(jù)。 方法:選擇健康雄性SD大鼠72只,均購自河北醫(yī)科大學(xué)試驗動物中心,體重180~220克,隨機分為四組,假手術(shù)組(A組),模型組(B組),腎康注射液治療組(C組)、苯那普利治療組(D組),每組各18只。所有大鼠按清潔級動物分籠喂養(yǎng),飲用潔凈水,飼養(yǎng)環(huán)境為每籠6只,溫度(23±2)。C,相對濕度為(55±2)%。將模型組和治療組大鼠行左側(cè)輸尿管梗阻術(shù),而假手
4、術(shù)組大鼠只打開腹腔并游離左側(cè)輸尿管不予結(jié)扎。C組大鼠在手術(shù)前24h開始給予腎康注射液5g/kg/d腹腔注射,A組及B組以等量的生理鹽水腹腔注射,D組將苯那普利研細后溶于生理鹽水中灌胃10mg/kg/d。在術(shù)后第3、7和14天分別處死各組中的6只大鼠,取出左側(cè)腎臟,行HE和MASSON染色,動態(tài)觀察腎臟病理學(xué)改變,比較腎間質(zhì)基質(zhì)含量和纖維化程度;用免疫組織化學(xué)方法檢測腎間質(zhì)中CTGF、HGF和Col Ⅲ的表達情況,并對以上實驗結(jié)果通過圖像
5、分析系統(tǒng)進行半定量分析。所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準差表示,組間比較采用方差分析,在SPSS12.0統(tǒng)計分析軟件上進行。 結(jié)果:在2周期間,模型組腎小管間質(zhì)區(qū)域可見CTGF和Col Ⅲ的表達均呈進行性升高,而治療組則能明顯降低CTGF和Col Ⅲ的表達,且與模型組比較有明顯差異(P<0.05),但兩治療組間無明顯差異(P>0.05);模型組腎小管間質(zhì)區(qū)域可見HGF的表達均呈進行性降低,而治療組則能明顯升高HGF的表達,且與模型組比較有明
6、顯差異(P<0.05),但兩治療組間無明顯差異(P>0.05)。左側(cè)腎臟病理學(xué)改變:假手術(shù)組大鼠腎臟外觀正常,大小如黃豆。梗阻大鼠的梗阻腎體積隨梗阻時間的延長而逐漸增大,增大的腎臟內(nèi)可見明顯積水,積液清亮透明,腎實質(zhì)隨梗阻時間延長而逐漸變薄,腎盂擴張,腎盞乳頭受壓,穹隆部乳頭變平鈍,部分成凹形,乳頭萎縮。模型組術(shù)后第3天,可見腎間質(zhì)水腫,腎小管擴張,小管間質(zhì)區(qū)域出現(xiàn)單核細胞、淋巴細胞浸潤,術(shù)后第7天上述變化更加明顯,發(fā)現(xiàn)擴張的腎小管有不
7、同程度的萎縮和壞死,術(shù)后第14天可見腎間質(zhì)區(qū)域炎細胞浸潤有所緩解,而腎間質(zhì)纖維化進行性加重;治療組可明顯減輕炎細胞浸潤,腎間質(zhì)纖維化,且兩治療組間無明顯差異;正常組則無上述變化。 結(jié)論:在單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎間質(zhì)中CTGF和Col Ⅲ的表達明顯升高,且隨著梗阻時間的延長,其表達數(shù)量也逐漸增加,出現(xiàn)腎間質(zhì)纖維化;而HGF的表達在早期迅速增加,后期隨著梗阻時間的延長,其表達數(shù)量也逐漸降低,出現(xiàn)腎間質(zhì)纖維化。腎康注射液與苯那普利均能有
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