P27kip1在雌二醇抑制血管平滑肌增殖中的表達(dá)和意義.pdf

1、 目的：本試驗(yàn)是研究細(xì)胞周期蛋白p27kip1在雌激素抑制血管平滑肌細(xì)胞的表達(dá)規(guī)律，從血管平滑肌細(xì)胞的增生周期著手阻斷細(xì)胞周期的進(jìn)行，可能為血管增殖性疾病的防治提供有效方法。　　方法：1.動(dòng)物模型建立250克左右，3個(gè)月齡雌性Wistar大鼠84只，去勢(shì)(去除卵巢)后隨機(jī)分為，單純靜脈移植組，去勢(shì)后靜脈移植組，去勢(shì)后靜脈移植給予17β-雌二醇(17β-estradiol，E2)治療組。共3組，每組7只，E2劑量為每天20μg/k

2、g，皮下注射，取1厘米長(zhǎng)自體頸經(jīng)脈移植到同側(cè)頸總動(dòng)脈上，分別于術(shù)后3，7，14，28天切取移植靜脈，進(jìn)行下列檢測(cè)。2.指標(biāo)檢測(cè)：(1)組織學(xué)觀察：HE染色，Verhoef彈力纖維染色，采用計(jì)算機(jī)圖像分析儀測(cè)量?jī)?nèi)膜，了解內(nèi)膜增生情況。(2)p27kip1與PCNA的免疫組化染色：觀察血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)p27kip1產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)變化及血管平滑肌細(xì)胞增殖情況，分析p27kip1表達(dá)對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響。(3)Westernblot檢測(cè)p27