棗和酸棗田間愈傷組織途徑芽再生技術(shù)優(yōu)化及其在多倍體誘變中的應(yīng)用.pdf

1、本研究以116個棗基因型和3個酸棗類型為試材，在田間條件下對影響枝條截面愈傷組織形成和芽再生的相關(guān)因素以及秋水仙素處理次數(shù)對多倍體的誘變效果進行了研究，優(yōu)化了田間愈傷組織途徑芽再生技術(shù)體系，并應(yīng)用于棗和酸棗多倍體誘導(dǎo)，獲得了9個多倍體材料。主要研究結(jié)果如下:
　　1.基因型對愈傷組織誘導(dǎo)有很大影響。在119個基因型中，出愈傷的基因型共113個，占供試總量的94.95％。根據(jù)愈傷組織的誘導(dǎo)從易到難將供試基因型分為5類。A類（75％＜

2、出愈率≤100％）占供試基因型的56.30％;B類(50％＜出愈率≤75％)占24.37％;C類（25％＜出愈率≤50％）占10.92％;D類（0＜出愈率≤25％）占3.36％;E類（出愈率為0）占5.05％。
　　2.基因型對芽再生能力亦有很大影響。在119個基因型中，截面愈傷誘導(dǎo)出芽的基因型共96個，占供試總量的80.67％。根據(jù)芽再生從易到難將基因型分為5類。Ⅰ類（平均單枝截面出芽數(shù)＞3.0）占供試基因型的20.17％;Ⅱ類

3、（2.0＜平均單枝截面出芽數(shù)≤3.0）占10.08％;Ⅲ類（1.0＜平均單枝截面出芽數(shù)≤2.0）占16.81％;Ⅳ類（0＜平均單枝截面出芽數(shù)為≤1.0）占33.61％;Ⅴ類(平均單枝截面出芽數(shù)為0)占19.33％。
　　3.對出愈率與平均單枝截面出芽數(shù)進行了相關(guān)性分析，結(jié)果表明，二者相關(guān)性不顯著;同時發(fā)現(xiàn)，愈傷組織等級對出芽數(shù)有一定的影響，隨著愈傷量的提高，單枝截面愈傷出芽數(shù)有一個升高的過程，5級愈傷的單枝出芽數(shù)較多，可達2.86

4、個，愈傷組織環(huán)超過截面半徑的1/2的6級愈傷組織芽再生能力稍微有所下降。
　　4.枝條粗度在一定程度上影響出芽能力，直徑為1.4-1.9cm的枝條比較容易芽再生，30d后的平均單枝截面出芽數(shù)可達2個，顯著高于粗度為0.9-1.4cm和1.9-2.4cm枝條的出芽數(shù);樹冠上部枝條的芽再生能力顯著高于中下部枝條;枝條水平位置和角度對芽再生能力沒有顯著影響。
　　5.秋水仙素處理次數(shù)對多倍體誘變效果有明顯影響。與0.05％秋水仙素

5、處理1次相比，處理2次時，各基因型的出愈率平均下降24.01％，平均單枝截面出芽數(shù)減少1.61個，平均誘變率下降2.52％。
　　6.優(yōu)化了田間愈傷組織途徑芽再生技術(shù)體系，具體的操作流程是:在5月中旬或者下旬，選擇位于樹體上部、直立、莖粗1.4～1.9cm的健壯枝條進行截枝，用1.5ml誘導(dǎo)劑(4.0mg·L-1 TDZ+2.0mg·L-1AgNO3)處理截面形成層24h，之后截面用濕泥保濕，直到芽體長達2cm左右。
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