糖化-氧化修飾白蛋白對血管內(nèi)皮細(xì)胞ezrin活化的調(diào)控及其機制研究.pdf

1、研究背景：
　　 隨著透析技術(shù)日臻成熟,慢性腎功能衰竭(chronic renal failure,CRF)病人因尿毒癥致死者日益減少,目前導(dǎo)致這類病人死亡的主要因為是CRF和透析的各類并發(fā)癥,心血管病是其中最重要的致死性并發(fā)癥。CRF病人動脈粥樣硬化的發(fā)生率是同年齡一般人群的10～20倍,且發(fā)病年齡提前至35～45歲,被稱之為“加速性動脈粥樣硬化”(accelerated atherosclerosis)。
　　 CR

2、F患者動脈粥樣硬化快速發(fā)生、發(fā)展的因為目前尚未闡明,但一般推測與兩方面因素有關(guān):(1)CRF往往合并高血壓、高脂血癥、糖尿病等已被證實是一般人群中促發(fā)心血管病的危險因素(傳統(tǒng)危險因素)；(2)CRF病人還合并一些與尿毒癥有關(guān)的可能促發(fā)心血管病的因素,包括貧血、二價離子代謝紊亂、微炎癥狀態(tài)等(尿毒癥相關(guān)的危險因素)。CRF時由于代謝紊亂,循環(huán)和組織中有多種糖和蛋白質(zhì)代謝終產(chǎn)物潴留。晚期糖基化終產(chǎn)物(advancedglycation en

3、d products,AGE)和晚期蛋白氧化產(chǎn)物(advanced oxidation proteinproducts,AOPP)是蛋白質(zhì)被糖化/氧化修飾后的產(chǎn)物,在CRF患者體內(nèi)異常升高,其水平與動脈粥樣硬化的發(fā)病率呈正相關(guān)。本實驗室近期用動物研究直接證實了AGE和AOPP修飾的蛋白對動脈粥樣硬化的促進作用,國內(nèi)外學(xué)者在進一步的體外實驗研究中發(fā)現(xiàn),AGE/AOPP修飾蛋白具有促發(fā)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的作用。體內(nèi)實驗已證實AGE修飾的血清白蛋白

4、,可顯著促進動脈粥樣斑塊的形成,斑塊部位血管內(nèi)膜下的炎癥細(xì)胞浸潤顯著增強。這些結(jié)果提示AGE/AOPP修飾蛋白可能參與了動脈粥樣硬化發(fā)展過程中的急性炎癥階段,促進白細(xì)胞通過血管內(nèi)皮屏障遷移至內(nèi)膜下(transendothelial migration,TEM)。
　　 TEM過程中,細(xì)胞骨架發(fā)生重組和再分布,形成應(yīng)力纖維,最終導(dǎo)致細(xì)胞間隙增大,形成細(xì)胞旁通路；與此同時,內(nèi)皮細(xì)胞膜表面的粘附分子重新分布,聚集在細(xì)胞表面的微突起、微

5、絨毛等部位,引導(dǎo)活化的白細(xì)胞穿過細(xì)胞旁通路。而胞漿內(nèi)細(xì)胞骨架重組和膜表面粘附分子重新分布均受埃茲蛋白、根蛋白、膜突蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)蛋白家族的控制和協(xié)調(diào)。ERM蛋白一般處于非活化、非磷酸化狀態(tài),活化的ERM蛋白N端和粘附分子在胞內(nèi)結(jié)合,C端和細(xì)胞骨架F-肌動蛋白結(jié)合,成為鏈接細(xì)胞表面粘附分子與胞漿內(nèi)細(xì)胞骨架的“橋梁”。有研究表明,ERM蛋白同小GTP結(jié)合蛋白家族Rho/Rac信號通路的作用介導(dǎo)了細(xì)胞

6、骨架和粘附分子的重新分布,提示ERM蛋白同Rho/Rac信號通路在TEM過程中發(fā)揮了重要的作用,但它們間的作用機制目前尚不清楚。
　　 綜上,AGE/AOPP可能參與了“加速性動脈粥樣硬化”發(fā)展過程中的急性炎癥階段,促進白細(xì)胞通過血管內(nèi)皮屏障遷移至內(nèi)膜下。而ERM是介導(dǎo)TEM過程的關(guān)鍵分子,那么AGE/AOPP是否參與了對ERM蛋白活化的調(diào)控及其可能存在的機制,目前尚不清楚。本研究旨在觀察AGE和AOPP修飾蛋白對人血管內(nèi)皮細(xì)胞