MicroRNA34a靶向Notch1影響乳腺癌細胞對阿霉素藥物的敏感性.pdf

1、目的：1.研究miR34a對Notch1的靶向作用;2.通過miR34a過表達或抑制其表達來檢測乳腺癌細胞對阿霉素藥物的敏感性。
　　方法：1.實時熒光定量PCR檢測miR34a在MCF-7和MCF-7/ADR乳腺癌細胞中的表達情況，進一步驗證是否與芯片結果相符。2.使用Lipofectamine2000對2株細胞分別轉染miR-34a mimics或inhibitor。3.Westemblot和實時熒光定量PCR等方法檢測轉染前

2、后2組細胞中Notch1蛋白及其mRNA的表達情況。4.MTT實驗、細胞凋亡實驗等方法觀察miR34a過表達或被抑制是否影響乳腺癌細胞對阿霉素藥物的敏感性。5.實時熒光定量PCR檢測新輔助化療的乳腺癌組織標本中miR34a和Notch1的表達情況以及與化療療效的關系。6.統(tǒng)計學分析實驗結果均經(jīng)SPSS16.0軟件統(tǒng)計。各實驗至少獨立重復3次，重復性好。數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示，組間比較采用方差分析。相關性分析采用Spearman相關分析

3、。以P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。
　　結果：1.miR34a在MCF-7/ADR乳腺癌細胞中的表達較MCF-7親代細胞中的表達顯著下調，與芯片結果相符。2.MCF-7/ADR細胞轉染miR-34a mimics后Notch1蛋白及其mRNA的表達下調;MCF-7細胞轉染miR-34a inhibitor后Notch1蛋白及其mRNA的表達上調。3.miR34a過表達后MCF-7/ADR細胞對阿霉素的IC50（半數(shù)抑制量）降低，細