Src激酶和VE-cadherin磷酸化參與顱內動脈瘤形成的研究.pdf

1、目的：
　　 顱內動脈瘤形成的病因和發(fā)病機制目前仍不清楚，最近研究發(fā)現(xiàn)血流動力學改變導致的血管內皮損害及血管壁炎癥可能是顱內動脈瘤形成的始動環(huán)節(jié)。VE-cadherin在內皮損傷修復、維持血管壁通透性和調控炎癥細胞浸潤等方面發(fā)揮著重要作用，src激酶調控VE-cadherin磷酸化水平及炎癥相關細胞內信號轉導。最近發(fā)現(xiàn)VE-cadherin在顱內動脈瘤壁的表達明顯減少的基礎上，結合國內外對顱內動脈瘤形成機制和血管內皮細胞間連接及

2、其調控兩方面的研究進展，應用實驗性大鼠顱內動脈瘤模型模擬體內顱內動脈瘤形成過程中的血管壁的損害，研究顱內動脈瘤形成過程中src激酶和VE-cadherin磷酸化的表達
　　 方法：
　　 1：建立腎性高血壓誘導的SD大鼠實驗性顱內動脈瘤模型：將60只雄性SD大鼠，隨機分為2組。手術組即銀夾組40只，用內徑為0.3mm的銀夾夾閉雙側腎動脈主干使雙側腎動脈主干狹窄和左側頸總動脈結扎。手術組術后次日給予2％的鹽水的高鹽飲食喂養(yǎng)

3、，誘導動脈瘤的發(fā)生；對照組即假手術組20只，僅暴露雙側腎動脈主干和左側頸總動脈，不作其他處理，術后正常喂養(yǎng)。術后喂養(yǎng)3個月后處死SD大鼠。在顯微鏡下解剖出腦底部的willis動脈環(huán)，取右側大腦前動脈-嗅動脈(ACA-OA)的分叉處血管。
　　 2：應用蛋白印跡(western boltting)檢測src激酶、phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)、phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和

4、phosph-VE-cadherin(Tyr-731)大鼠腦動脈瘤中的表達和實時定量PCR(RT-qPCR)的方法檢測src激酶在大鼠腦動脈瘤中的表達。
　　 結果：
　　 1、蛋白印跡結果(western boltting)：實驗組中src激酶、phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)、phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和phosphor-VE-cadherin(Tyr-731

5、)均有明顯表達。與正常組對比，實驗組的src激酶和phosphor-VE-cadherin(Tyr-685)，phosphor-VE-cadherin(Tyr-658)和phosphor-VE-cadherin(Tyr-731)的表達明顯升高。
　　 2、實時定量PCR(RT-qPCR)結果：實驗組src激酶mRNA表達與正常對照相比明顯升高(P<0.05)。
　　 結論：
　　 SD大鼠實驗性腦動脈瘤中src激