Th17免疫應(yīng)答參與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　 細(xì)胞因子參與的炎癥反應(yīng)己被證實(shí)在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成過程中扮演重要的角色?；罨腃D4+T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分泌的腫瘤壞死因子β(TNF-β),白細(xì)胞介素4(IL-4)和白細(xì)胞介素10(IL-10)已被研究證實(shí)在顱內(nèi)動(dòng)脈瘤壁的存在。Th17細(xì)胞是新近發(fā)現(xiàn)的一群分泌白細(xì)胞介素17(IL-17)的CD4+T細(xì)胞亞群,其分泌的IL-17參與多種慢性炎癥疾病。本研究先通過改良Sprague-Dawley(SD)

2、大鼠的顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型來建立SD大鼠的腦動(dòng)脈瘤,然后用免疫組化方法檢測(cè)SD大鼠以及人的顱內(nèi)動(dòng)脈瘤壁中細(xì)胞因子IL-17和Th17免疫應(yīng)答特異性標(biāo)志物一特異轉(zhuǎn)錄因子PORγt的表達(dá)水平,證實(shí)Th17細(xì)胞可能參與顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的炎癥反應(yīng)過程。
　　 方法:
　　 1.SD大鼠實(shí)驗(yàn)性顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型的改良,取SD大鼠35只,隨機(jī)分為3組。銀夾組15只,銀央鉗夾致雙側(cè)腎動(dòng)脈主干狹窄+結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈；傳統(tǒng)組15只,絲線結(jié)扎兩側(cè)腎動(dòng)脈

3、后支+左側(cè)頸總動(dòng)脈。銀夾組和傳統(tǒng)組術(shù)后第二天予以2％的鹽水喂養(yǎng)；對(duì)照組即假手術(shù)組5只,術(shù)后正常喂養(yǎng)。術(shù)后3個(gè)月后處死大鼠。在顯微鏡下解剖腦底動(dòng)脈環(huán),取右側(cè)大腦前動(dòng)脈-嗅動(dòng)脈(ACA-OA)的分叉處血管,在光鏡下用組織病理學(xué)的方法觀察其病理變化。
　　 2.建立腎性高血壓誘導(dǎo)的SD大鼠實(shí)驗(yàn)性顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型后,獲取SD大鼠實(shí)驗(yàn)性顱內(nèi)動(dòng)脈瘤,對(duì)照組標(biāo)本為假手術(shù)組動(dòng)物相同部位的正常血管。另外收集15個(gè)人的顱內(nèi)動(dòng)脈瘤組織標(biāo)本,以5例非腦血

4、管疾病患者的顳淺動(dòng)脈作為正常對(duì)照。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)IL-17和RORγt在大鼠腦動(dòng)脈瘤壁中的表達(dá),以及人腦動(dòng)脈瘤壁IL-17、RORγt、LCA和CD4的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.SD大鼠右側(cè)大腦前動(dòng)脈.嗅動(dòng)脈分叉部,銀夾組實(shí)驗(yàn)性大鼠腦動(dòng)脈瘤的發(fā)生率為53.33％；傳統(tǒng)組發(fā)生率為46.15％,兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)明顯差異(P>0.5)。對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)顱內(nèi)動(dòng)脈瘤。但與傳統(tǒng)組(15.61±5.23min)相比,銀央組手術(shù)

5、操作時(shí)間(5.43±0.96min)明顯縮短(P<0.05),動(dòng)物存活率也較高。
　　 2.SD大鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤壁上IL-17和RORγt有明顯表達(dá),且IL-17和RORγt表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.917,P<0.01),而正常對(duì)照SD大鼠腦動(dòng)脈血管壁上無IL-17和RORγt的表達(dá)。IL-17和RORγt在人顱內(nèi)動(dòng)脈瘤壁也明顯表達(dá)且呈正相關(guān)(r=0.903,P<0.01),而正常對(duì)照顳淺動(dòng)脈壁上無IL-17和RORγt的表達(dá)。同時(shí)