多維色譜法分析毛白楊次生維管系統(tǒng)再生過程的蛋白質(zhì)表達(dá)譜.pdf

1、中國彝耋蟹學(xué)坼憲葩學(xué)位論文多維色譜法分析毛白楊次生維管系統(tǒng)再生過程的蛋白質(zhì)表達(dá)譜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別指導(dǎo)教師論文完成實(shí)驗(yàn)室論文答辯日期陳軍博士聲孟拄(研究員、博士)林業(yè)所生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室2006年06月28日⑧中國北京在次生維管系統(tǒng)再生的初期，細(xì)胞開始脫分化，并且形成大量愈傷組織，細(xì)胞分裂旺盛。與細(xì)胞周期及細(xì)胞分裂相關(guān)的28個(gè)蛋白中，有65％集中在這一時(shí)期內(nèi)大量表達(dá)。在次生維管系統(tǒng)再生的中期，主要是形成層的形成及分化。這一過程涉及形成層的形成

2、和維持，韌皮部及木質(zhì)部原始細(xì)胞、母細(xì)胞的分裂分化，維管束發(fā)育的徑向模式調(diào)控等，因此代謝活動(dòng)旺盛，各種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄因子非?；钴S，調(diào)控基因表達(dá)譜的轉(zhuǎn)變。在這一時(shí)期，共發(fā)現(xiàn)了9種與生長素信號(hào)傳遞相關(guān)的蛋白，5種與乙烯信號(hào)傳遞相關(guān)的蛋白和一種赤霉素信號(hào)傳遞相關(guān)的蛋白另外，還發(fā)現(xiàn)4個(gè)鈣調(diào)素及鈣調(diào)磷酸酶，2個(gè)G蛋白等多種下游信號(hào)傳遞物及第二信使。在次生維管系統(tǒng)再生的后期，各種組織已基本形成，細(xì)胞次生壁開始加厚。這一時(shí)期共發(fā)現(xiàn)8種纖維素及木質(zhì)素合成

3、相關(guān)酶類，1種果膠酯酶和1種半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，以及3種還未經(jīng)證實(shí)的胞壁合成相關(guān)酶類。因此基因的特異表達(dá)與維管組織再生進(jìn)程相一致，這為進(jìn)一步揭示它們?cè)谀静男纬蛇^程中的作用奠定了基礎(chǔ)。分別進(jìn)行了11種蛋白相應(yīng)編碼基因的表達(dá)模式和表達(dá)水平分析，結(jié)果顯示其中有8個(gè)基因的mRNA表達(dá)模式與蛋白質(zhì)表達(dá)模式一致：2個(gè)基因的mRNA表達(dá)與蛋白質(zhì)表達(dá)雖然模式一致，但mRNA水平的變化不明顯；另外1個(gè)基因的mRNA表達(dá)與蛋白質(zhì)表達(dá)模式完全不一致。這顯示多數(shù)基

4、因的表達(dá)在KNA水平和蛋白水平相一致，但部分基因的表達(dá)調(diào)控主要不在mRNA水平上，還受到翻譯水平及翻譯后修飾的調(diào)控。也說明mRNA的水平不一定反映出基因的表達(dá)水平，因此直接對(duì)參與生物學(xué)過程的蛋白質(zhì)分析更加重要。本研究不但建立了一套針對(duì)楊樹發(fā)育中的維管組織蛋白質(zhì)的液相色譜分離及質(zhì)譜鑒定的技術(shù)體系，而且找到了眾多可能參與木材形成相關(guān)的蛋白質(zhì)及其編碼基因，可作為分離、鑒定決定木材形成關(guān)鍵基因的候選基因，為木材材性改良的基因工程育種提供了理論基