不同預(yù)處理對大鼠肝移植供肝保護(hù)作用的探討.pdf

1、缺血預(yù)處理是短期缺血應(yīng)激使機(jī)體組織對隨后更長時間缺血再灌注損傷產(chǎn)生明顯保護(hù)作用的一種適應(yīng)性機(jī)制，缺血預(yù)處理的保護(hù)作用具有呈初始階段、延遲階段雙峰表現(xiàn)的特點。熱休克預(yù)處理同樣可以為組織提供保護(hù)作用，但僅具有延遲階段的保護(hù)作用。研究預(yù)處理的機(jī)制是為了給肝移植、肝臟手術(shù)等提供更好的肝臟保護(hù)方法。目前預(yù)處理的機(jī)制尚未徹底闡明，爭論較多。 目的： 本研究通過應(yīng)用缺血、加熱等多種手段對大鼠供肝進(jìn)行移植術(shù)前的預(yù)處理，比較各種預(yù)處理方法

2、對大鼠肝移植供肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，并在不同預(yù)處理方法中的應(yīng)用一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N-]E硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)，從而探討預(yù)處理對肝臟的保護(hù)機(jī)制。 第一部分不同干預(yù)手段對大鼠供肝缺血損傷的保護(hù)作用 目的：建立多種對大鼠肝臟的預(yù)處理模型，比較各種預(yù)處理方法對大鼠肝臟的保護(hù)效果。 方法：將SD大鼠48只，隨機(jī)分為六組：全肝缺血預(yù)處理組、半肝缺血預(yù)處理組、肝外臟器(脾臟)缺血預(yù)處理組、熱休克

3、預(yù)處理組、熱休克+半肝缺血預(yù)處理組及假手術(shù)對照組，對大鼠肝臟進(jìn)行處理，肝臟離體保存，再檢測離體肝臟灌洗液的ALT水平及肝臟的形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果：半肝缺血預(yù)處理組、熱休克預(yù)處理組的供肝灌洗液中的ALT水平明顯低于對照組(P<0．05)；熱休克+半肝缺血預(yù)處理組供肝灌洗液中的ALT水平也低于對照組，卻明顯高于前面兩組(P<0.05)。全肝缺血預(yù)處理組、脾臟缺血預(yù)處理組的供肝灌洗液中的ALT水平也低于對照組(P<0．05)。肝臟的形態(tài)

4、學(xué)變化提示類似的結(jié)果。 結(jié)論：各種預(yù)處理均起到了保護(hù)大鼠肝臟的作用；半肝缺血預(yù)處理和熱休克預(yù)處理對大鼠肝臟的保護(hù)作用最明顯；將肝臟缺血及熱休克預(yù)處理聯(lián)合處理大鼠，其保護(hù)作用明顯弱于單獨缺血或單獨熱休克的預(yù)處理. 第二部分大鼠模擬肝移植模型的制備及其價值的研究 目的：制備大鼠原位肝移植和模擬原位肝移植的方法；對兩種方法進(jìn)行比較。 方法：建立大鼠原位肝移植模型(改良雙套管法)；建立大鼠模擬肝移植模型(鉗夾法)

5、；比較兩種模型在制備、術(shù)后肝功能和存活率之間的差異。 結(jié)果：改良雙套管法的大鼠原位肝移植模型的建立需要大量的訓(xùn)練；大鼠模擬原位肝移植模型的方法比較簡單；后者在操作掌握度和術(shù)后肝功能和存活率等方面優(yōu)于前者。 結(jié)論：大鼠模擬肝移植模型的方法操作簡單，干擾因素少，可以在一些研究中替代原位肝移植模型。 第三部分不同肝臟預(yù)處理對大鼠肝移植中供肝保護(hù)作用的比較 目的：通過大鼠模擬肝移植的模型，比較各種預(yù)處理對移植肝的

6、保護(hù)作用。 方法：將SD大鼠50只，隨機(jī)分為五組：肝臟缺血預(yù)處理組、脾臟缺血預(yù)處理組、熱休克預(yù)處理組、熱休克+缺血預(yù)處理組及手術(shù)對照組，分別進(jìn)行肝臟預(yù)處理后進(jìn)行模擬原位肝移植術(shù)，術(shù)后檢測膽汁流量，術(shù)后24小時檢測血清ALT、AST、ALP和肝臟形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果：肝臟缺血預(yù)處理組、熱休克預(yù)處理組的移植后膽汁分泌量多于對照組，血清ALT、AST水平明顯低于對照組(P<0．05)；熱休克+缺血預(yù)處理組的血清ALT水平低于對照

7、組(P<0．05)，膽汁分泌量及血清AST與對照組沒有顯著差異；脾臟缺血的膽汁分泌量多于對照組，血清ALT水平低于對照組(P<0．05)。 結(jié)論：肝臟缺血預(yù)處理初始階段保護(hù)作用最明顯，將缺血及熱休克預(yù)處理兩種方法聯(lián)合處理大鼠時，其保護(hù)作用弱于單獨缺血或單獨熱休克的預(yù)處理方法；脾臟缺血預(yù)處理也具有保護(hù)肝臟的作用。 第四部分一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N．亞硝基．L前氨酸甲酯(L-NAME)對不同預(yù)處理在大鼠肝移植供肝保護(hù)作

8、用中的影響 目的：進(jìn)行各種預(yù)處理前應(yīng)用一氧化氮合酶(NOS)抑制劑N．亞硝基．L．精氨酸甲酯(L-NAME)，觀測其對肝移植供肝的影響。 方法：將SD大鼠30只，隨機(jī)分為三組：肝臟缺血預(yù)處理組、熱休克預(yù)處理組及熱休克+缺血預(yù)處理組，分別在術(shù)前注射L-NAME，進(jìn)行相應(yīng)肝臟預(yù)處理后行模擬肝移植術(shù)，術(shù)后檢測膽汁流量，術(shù)后24小時檢測血清ALT、AST、ALP和肝臟形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果：注射L-NAME后，肝臟缺血預(yù)處理