肝動(dòng)脈血供對(duì)大鼠肝移植后膽道影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 1、建立一種可行的、重復(fù)性好、手術(shù)成功率高的肝動(dòng)脈重建的大鼠原位肝移植模型，為研究原位肝移植(OLT)術(shù)后移植免疫、膽道并發(fā)癥等提供一個(gè)更加符合生理的動(dòng)物模型。 2、研究肝動(dòng)脈重建的大鼠肝移植模型的術(shù)后膽道病理、生化的變化。 3、觀察肝動(dòng)脈血供對(duì)大鼠肝移植后膽道的保護(hù)作用。 方法： 1、取雄性SD大鼠作為同品系異體肝移植的供受體。供體手術(shù)：整塊切取供體的肝臟，并在保存液中將供體門(mén)靜脈和供體

2、肝下下腔靜脈套上袖套；受體手術(shù)：以經(jīng)典的“二袖套”法(即肝上下腔靜脈縫合加肝下下腔靜脈及門(mén)靜脈袖套吻合)為基礎(chǔ)，再以供體腹腔動(dòng)脈與受體右腎動(dòng)脈作端一端吻合，建立重建肝動(dòng)脈的大鼠肝移植模型。 2、取96只雄性SD大鼠作為同品系大鼠肝移植的供受體，并隨機(jī)分為兩組，非動(dòng)脈化雙袖套法大鼠肝移植組作為對(duì)照組，動(dòng)脈化雙袖套法大鼠肝移植組作為對(duì)照組作為實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組造模成功后，每組24只，不同時(shí)間點(diǎn)各取6只麻醉下下腔靜脈取血、取膽管組

3、織，分別行肝功能和病理學(xué)檢查。 結(jié)果： 1、成功建立動(dòng)脈化雙袖套法的大鼠肝移植模型，成功率為92.8％，一周存活率為87.3％。平均手術(shù)時(shí)間：供體為(50±10)min，袖套式吻合為(2±1)min；體外修肝時(shí)間為(11±1)min，受體為(35±10)min，血管吻合為(15±10)min，無(wú)熱缺血時(shí)間，冷缺血時(shí)間(45±10)min，受體無(wú)肝期(15±2)min。正式實(shí)驗(yàn)40例，有3例術(shù)中即死亡，其中1例死于呼吸驟停

4、，2例死于肝上下腔靜脈吻合口出血。成活的37只大鼠有2例于術(shù)后死亡，1例于術(shù)后第3天死亡，死于胃擴(kuò)張；另1例于術(shù)后第5天死亡，原因?yàn)槟懙乐Ъ苓B接處有膽漏，形成膽汁性腹膜炎。術(shù)后1周處死大鼠時(shí)均未發(fā)現(xiàn)吻合的動(dòng)脈發(fā)生栓塞。 2、實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組比較，體重、手術(shù)成功率、1周存活率無(wú)顯著性差異(P>0.05)；在術(shù)后肝功能恢復(fù)方面，實(shí)驗(yàn)組明顯優(yōu)于對(duì)照組。術(shù)后進(jìn)行的大鼠ALT、r-GT檢測(cè)，從術(shù)后第4天起，動(dòng)脈化模型與非動(dòng)脈化模型有顯著性差

5、異(P<0.05)。在光鏡方面，實(shí)驗(yàn)者和對(duì)照組相比較，在術(shù)后第1天和第2天無(wú)明顯差別，從術(shù)后第4天開(kāi)始，可觀察到對(duì)照組膽管上皮細(xì)胞局部脫落壞死，術(shù)后第10天可觀察到膽道上皮細(xì)胞排列紊亂，甚至出現(xiàn)空泡變性，而實(shí)驗(yàn)組膽道上皮損傷明顯輕于對(duì)照組。從電鏡結(jié)果亦看出，實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后多個(gè)時(shí)間點(diǎn)均未出現(xiàn)膽管上皮的超微結(jié)構(gòu)變化，而對(duì)照組則從術(shù)后第7天開(kāi)始出現(xiàn)了明顯的缺血再灌注損傷的改變。 結(jié)論： 1、我們建立的動(dòng)脈化雙袖套法大鼠肝移植模型