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文檔簡介
1、目的:探討Ezrin蛋白對人高低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞亞系中的細胞增殖和侵襲能力的影響。 方法:利用免疫組化,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),免疫?。╓estern.Blot),放射免疫顯像(RII)方法檢測Ezrin蛋白在高低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞中的表達情況。采用四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞增殖能力及黏附率。 結(jié)果:高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞中Ezrin在基因和蛋白表達均顯著高于低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-4
2、35s細胞。高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞增殖能力和粘附率也都高于低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞。131I標記的抗Ezrin抗體,在接種高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞裸鼠腫瘤部位放射性濃聚強于接種低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞裸鼠腫瘤部位放射性聚。 (1)免疫組化結(jié)果顯示:在高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞中Ezrin在胞漿胞膜呈強染色,呈強陽性,其平均光密度值為0.59±0.04;在低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌
3、細胞中細胞膜少量淺黃染色,呈弱陽性,其平均光密度值為0.12±0.02。圖像分析和統(tǒng)計學結(jié)果表明,低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞與高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞相比較,染色減弱具有非常顯著性差異(P<0.01)。 (2)RT-PCR分析結(jié)果顯示:Ezrin mRNA在高轉(zhuǎn)潛能移MDA-MB-435s細胞表達水平明顯高于低轉(zhuǎn)移潛能的MDA-MB-435s細胞,Ezrin在高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞中表達的平均光密度值為0.69±0.07,在
4、低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細胞中表達的平均光密度值為0.15±0.03,兩者比較,有非常顯著性差異(P<0.01)。 (3)Western.Blot結(jié)果顯示:高轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細胞中Ezrin蛋白表達的平均光密度值為0.62±0.10,低轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細胞中Ezrin蛋白表達的平均光密度值為0.13±0.04,高轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細胞Ezrin蛋白表達水平亦明顯高于低轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s
5、細胞,有非常顯著性差異(P<0.01)。 (4)31I標記抗Ezrin抗體對荷MDA-MB-435s細胞的裸鼠SPECT顯像結(jié)果顯示:接種高轉(zhuǎn)移潛能細胞裸鼠腫瘤部位放射性濃聚較強,其平均光密度值為0.53±0.07;接種低轉(zhuǎn)移潛能腫瘤部位放射性濃聚較弱,其平均光密度值為0.12±0.03,有非常顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論:在不同轉(zhuǎn)移潛能的乳腺癌MDA-MB-435s細胞中,Ezrin在高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細胞中的表達
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