Midkine在乳腺癌組織中表達(dá)特性及其在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用研究.pdf

1、目的：檢測Midkine(MK)蛋白在乳腺癌組織及其癌旁組織中的表達(dá)情況，以明確MK蛋白在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。通過研究MK蛋白對乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231細(xì)胞增殖，粘附，遷移和侵襲的影響，闡明MK蛋白在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用。
　　方法：1.采用免疫組化PV兩步法檢測44例乳腺癌及相應(yīng)癌旁組織(癌旁2cm)中MK蛋白的表達(dá)，并分析其與不同臨床病理特征之間的關(guān)系。2.采用shRNA干擾技術(shù)降低MDA-MB-231細(xì)胞MK基因表

2、達(dá)。實(shí)驗(yàn)分為三組:未處理組、空載體轉(zhuǎn)染組和MK基因干擾組。采用CCK-8檢測細(xì)胞的增殖能力;細(xì)胞與胞外基質(zhì)蛋白（fibronectin）作用30min后，檢測其粘附能力;采用Transwell檢測細(xì)胞的侵襲能力和遷移能力，分析MK對乳腺癌細(xì)胞增殖及侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：1.乳腺癌及相應(yīng)癌旁組織中MK蛋白的陽性率分別為90.91％(40/44)、11.36％(5/44)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.MK蛋白在乳腺癌

3、組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)，與患者年齡、腫瘤大小、病理分級、臨床分期無關(guān)(P＞0.05)。3.與未處理組和空載體轉(zhuǎn)染組相比，MK基因干擾組MDA-MB-231細(xì)胞在接種24h、48h、72h增殖能力均降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);空載體轉(zhuǎn)染組與未處理組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.與fibronectin作用30min后，MK基因干擾組細(xì)胞粘附能力低于空載體轉(zhuǎn)染組和未處理組(P＜0.05)，而空載體轉(zhuǎn)染組與未處

4、理組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.MK基因干擾組與空載體轉(zhuǎn)染組和未處理組相比，穿過PET膜（孔徑8μm）的細(xì)胞數(shù)減少(P＜0.05)，而空載體轉(zhuǎn)染組與未處理組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.MK基因干擾組細(xì)胞的侵襲能力低于空載體轉(zhuǎn)染組和未處理組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而空載體轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的侵襲能力與未處理組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1.MK蛋白在乳腺癌組織中過量表達(dá)，可能與乳腺癌發(fā)生有關(guān)。2.MK蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)