去甲斑蝥素固脂分散體肝動脈緩釋栓塞微球的制備與藥效學研究.pdf

1、目的：本文將模型藥物去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)經(jīng)過前處理制成去甲斑蝥素固脂分散體,再以生物材料海藻酸鈉(alginate,ALG)及殼聚糖(chitosan,CS)為載體,制備了去甲斑蝥素固脂分散體-海藻酸鈉／殼聚糖肝動脈栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)微球。并通過介入方法治療肝癌,以期達到緩釋、靶向、栓塞三重功效,減小藥物刺激性,提高肝癌組織中

2、藥物濃度,加快肝癌細胞凋亡的目的,為臨床治療不可切除性肝癌提供借鑒。
　　 方法：①采用外部凝膠化法,制備甲斑蝥素固脂分散體微球(LSD／NTCD-ACM)。對殼聚糖與海藻酸鈉比例、二者加入順序、反應溫度、乳化劑加入量、脂質(zhì)的選擇及其比例進行了單因素考察；并選定藥脂比、固分體與載體比例、氯化鈣濃度為因素,載藥量、載藥量、一周剩余釋放率為因素進行了正交設計優(yōu)化。②應用掃描電鏡觀察微球的表面形態(tài),采用紅外光譜(FT-IR)、X-粉末

3、衍射法(X-RD)和差示掃描量熱法(DSC)驗證微球的結構及生成機理。并對微球的粉體學性質(zhì)、懸浮性及導管推注實驗進行考察。③采用體外動態(tài)透析法在pH7.4磷酸鹽緩沖液釋放介質(zhì)中測定去甲斑蝥素不同制劑及不同粒徑載藥微球的釋藥性能,并對微球的穩(wěn)定性進行考察。④選用新西蘭大白兔作為動物模型,采用開腹直視下腫瘤組織塊包埋法、超聲引導下穿刺針種植法和活檢針種植法分別于兔肝左頁進行腫瘤種植,并于不同時間用超聲和CT檢查腫瘤生長大小,進行方法比較。⑤

4、將荷瘤兔隨機分為4組,分別為:藥物微球組(60～125／um)、藥物微球組(125～200／um)、NCTD溶液組(NCTD1.0 mg·kg-1)及空白對照組(未做任何處理)。各組荷瘤兔分別經(jīng)股動脈插管至肝左動脈或肝固有動脈并注入準備好的制劑。治療后,觀察各組治療效果以及TACE對肝功能的影響。
　　 結果：⑴單因素考察表明海藻酸鈉與殼聚糖加入順序,二者比例,乳化劑加入量及反應溫度對微球形態(tài)影響較大,而固體脂質(zhì)的選擇及比例則對

5、微球緩釋性能影響較大。采用正交設計優(yōu)化工藝制備所得的微球包封率87.31％,載藥量9.46％,一周剩余釋放率39.50％,滿足栓塞微球的要求。⑵掃描電鏡照片顯示微球外觀圓整,表面光滑,分散良好。FT-IR、X-RD和DSC圖譜表明殼聚糖與海藻酸鈉反應,蟲白蠟物理包裹,去甲斑蝥素分散在微球骨架中。粉體學性質(zhì)考察結果符合要求,流動性好,懸浮性好。導管推注實驗表明微球不堵塞管道,推注順利。⑶固分體微球一周突釋率60％左右,其后緩緩釋放15-2

6、0天,微球釋放符合威布爾模型；藥物微球粒徑越大緩釋效果越好。⑷三種腫瘤種植方法比較發(fā)現(xiàn),包埋法對兔子的損傷大,恢復慢；穿刺針法異位種植率高；活檢針法操作更加簡便,腫瘤活性損傷小,不易從肝組織中掉出,成功率較前二者高。腫瘤于接種后均在2～4周生長最旺盛,4周后腫瘤中心出現(xiàn)變性壞死,并有周圍淋巴結及肺轉移。綜合比較本文采用超聲引導下活檢針法種植。⑸治療后,對比各組荷瘤兔的腫瘤體積、生長曲線、生命延長率及病理切片結果。在14 d的觀察期內(nèi),藥

7、物微球組相對于NCTD溶液及對照組均有顯著的治療效果,其中粒徑較小者對腫瘤殺傷作用強,但損傷同樣較大,而NCTD組藥效短暫無明顯生命延長作用。毒性結果顯示,處理組術后均呈現(xiàn)一過性的肝損傷,藥物微球組損傷更為嚴重,恢復時間稍長,而小粒徑組程度深于粒徑較大者。
　　 結論：本文制備的LSD／NTCD-ACM釋放性能良好,將NCTD前處理制成固脂分散體實現(xiàn)了小分子水溶性藥物緩釋性能的突破,且制得的微球具有較高的載藥量和包封率,表面光滑