阿苯達唑固分體微球及殼聚糖納米粒的研制.pdf

1、目的:本文以阿苯達唑-PEG6000固體分散體(ABZ-PEG6000-SD，ASD)為前體藥物，制備阿苯達唑固體分散體微球;同時以阿苯達唑(Albendazole，ABZ)為模型藥物，泊洛沙姆Po188為助溶劑，制備阿苯達唑殼聚糖納米粒(ABZ-CS-NPs)。針對ABZ-CS-NPs，建立高效液相色譜(HPLC)法測定生物樣品中原料藥和代謝物的藥物濃度，熒光標記殼聚糖在裸鼠體內(nèi)熒光成像驗證納米粒的肝靶向性，初步藥效學(xué)考察納米粒的肝靶

2、向治療效果，旨在研究在體內(nèi)的吸收、分布、和代謝，以期達到較強的肝靶向性，為其進一步研究與臨床開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法:(1)熔融法制備阿苯達唑-PEG6000固體分散體，將其作為中間劑型，采用乳化-交聯(lián)法制備阿苯達唑-PEG6000固體分散體殼聚糖微球(ASD-CS-MS)，單因素篩選和正交設(shè)計優(yōu)化制備工藝;電鏡、紅外、粉末X射線衍射技術(shù)對微球進行質(zhì)量表征;動態(tài)透析法探究微球的體外釋放特性。(2)以殼聚糖為載體，采用離

3、子交聯(lián)-乳化溶劑揮發(fā)法制備阿苯達唑殼聚糖納米粒，考察乳化劑泊洛沙姆188的含量、TPP用量、攪拌速度、藥載比、溫度，冰醋酸用量對納米粒粒徑及分布、包封率、載藥量的影響，通過單因素和均勻設(shè)計優(yōu)化納米粒的處方工藝;透射電鏡觀察納米粒的表面形態(tài);動態(tài)激光粒度測定儀測定納米粒平均粒徑與粒度分布;HPLC測定所制備納米粒制劑的包封率和載藥量;以2％乳糖為凍干保護劑，真空冷凍干燥法制備其凍干粉末制劑，考察凍干后對納米膠體的粒徑分布、電鏡下外觀和包載

4、率的影響。(3)cy7熒光素標記CS，以cy7-CS為載體制備納米粒，將空白熒光殼聚糖組和熒光殼聚糖納米粒組給藥后，在特定時間點觀察藥物及載體在裸鼠體內(nèi)的分布和代謝，初步評估納米粒在動物體內(nèi)的分布情況。(4)以實驗室自制阿苯達唑混懸液為參比制劑，兩組SD大鼠分別給予ABZ-CS-Nps和ABZ混懸液，采用液-液萃取法處理生物樣品，甲苯咪唑(mebendazole，MBZ)為內(nèi)標，RP-HPLC法測定ABZ和ABZSX血藥濃度，以藥動學(xué)參

5、數(shù)(AUC，AUQ，Cmax，Tmax)為評價指標，采用3P97軟件計算藥動學(xué)參數(shù)。(5)超聲引導(dǎo)經(jīng)皮穿刺和開腹注射接種泡球蚴組織，建立動物模型，將80只有肝臟病變的肝泡狀棘球蚴模型大鼠隨機分為每組20只，分四組不同給藥途徑給藥，觀察各組病理組織學(xué)改變。
　　 結(jié)果:(1)掃描電鏡照片顯示微球形態(tài)圓整，粒徑分布均勻，平均粒徑約(210±8)μm，且大小在100-300μm內(nèi)的微球占總數(shù)60％以上;紅外、X-ray衍射均證明藥物吸

6、收峰均消失或轉(zhuǎn)移，藥物包載其中;微球流動性較好，粉體學(xué)性質(zhì)考察結(jié)果符合要求;微球在0.1mol·L-1HCl、醋酸鹽(pH3.5)和PBS(pH7.4)中的釋放均遵循Higuchi方程。(2)采用優(yōu)化工藝制備的納米粒平均粒徑(157.8±2.82)nm，載藥量(13.38±0.44)％，包封率(79.57±0.96)％;透射電鏡照片顯示納米粒外觀圓整，粒徑分布均勻;納米粒膠體釋放行為體現(xiàn)出顯著的緩釋特性和pH敏感性:釋放行為符合Higu

7、chi方程，pH越低越有利于納米粒的釋放。凍干后的納米粒呈多孔白色絮狀物，吸濕性強，可復(fù)溶為具有淡藍色乳光的納米粒溶液，平均粒徑可達200nm左右。(3)裸鼠熒光實驗表明，同等劑量下，空白組熒光素除少量在肝部代謝外全身彌散，而含藥納米粒組熒光顯影主要集中分布在肝臟上，顯示出納米粒較好的肝靶向性。(4)經(jīng)3P97軟件擬合，阿苯達唑和阿苯達唑亞楓血藥濃度在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)均符合口服吸收二室模型，與參比試劑相比，其相對生物利用度分別為146

8、.05％和222.15％，CL(s)(P＜0.05）降低，AUC、tmax、T1/2β增大，且MRT明顯延長（P＜0.05）。(5)與模型組相比，三種給藥途徑均對棘球蚴病均具有較好治療效果，經(jīng)門靜脈注射阿苯達唑納米球后，病理變化較口服及靜脈注射給藥明顯，抗包蟲病治療作用較好。
　　 結(jié)論:本法制備微球工藝穩(wěn)定，中間劑型顯著提高了原料藥的溶出速率，所制微球與原料藥相比，釋放程度顯著提高，同時具有顯著的緩釋效果。ABZ-CS-NPs