OPS-Ia的抗氧化及抗糖尿病作用研究.pdf

1、本文探討了仙人掌多糖分離和純化工藝，研究了仙人掌多糖組分OPS-Ia對(duì)大鼠紅細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷的保護(hù)作用。同時(shí)研究了OPS-Ia對(duì)鏈佐霉素糖尿病小鼠的治療作用，并對(duì)其抗糖尿病機(jī)制進(jìn)行了初步分析。 1.仙人掌多糖分離和純化 采用二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)模型，以多糖活性為目標(biāo)，研究超聲破碎時(shí)間、液料比、pH值對(duì)OPS得率及活性的影響。結(jié)果表明，對(duì)OPS得率影響最大的是超聲破碎時(shí)間，其次是液料比和浸提液pH值。pH值是影響多糖

2、活性的主要因素，在酸性或堿性條件下提取的OPS活性較低。回歸方程模型在本實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)可預(yù)測(cè)OPS得率。根據(jù)回歸方程得到OPS得率的最優(yōu)條件為超聲破碎時(shí)間46min，液料比38(mL·g<'-1>)，pH值7.12。OPS分別通過DEAE.Sepharose Fast Flow和Sephadex葡聚糖柱層析分離純化得到三種多糖組分，命名為OPS-Ia、OPS-Ib、OPS-Ⅱ，其均分子量分別為60 kDa、12 kDa、167 kDa。

3、 2.OPS-Ia對(duì)大鼠紅細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷的保護(hù)作用 方法：采用H202和Fe<'2+>/H<,2>O<,2>體系對(duì)大鼠紅細(xì)胞脂質(zhì)進(jìn)行氧化損傷，通過溶血率、高鐵血紅蛋白水平、紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化物含量、紅細(xì)胞膜蛋白巰基含量、紅細(xì)胞膜SOD活性和GSH-Px活性的測(cè)定來研究OPS-Ia的抗氧化作用。 結(jié)果：OPS-Ia能劑量依賴性夠抑制H<,2>O<,2>誘導(dǎo)的紅細(xì)胞溶血和高鐵血紅蛋白的產(chǎn)生；能劑量依賴性地提高Fe<'

4、2+>/H<,2>O<,2>誘導(dǎo)的紅細(xì)胞膜中SOD活性、GSH-Px活性和降低脂過氧化物的含量；同時(shí)，能夠抑制Fe<'2+>/H<,2>O<,2>引起的膜蛋白巰基含量的降低。 結(jié)論：OPS-Ia對(duì)H<,2>O<,2>和Fe<'2+>/H<,2>O<,2>引起的紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化損傷有保護(hù)作用。 3.OPS-Ia對(duì)鏈佐霉素糖尿病小鼠的抗糖尿病作用 方法：昆明種小鼠腹腔注射鏈佐霉素120 mg·kg<'-1>誘導(dǎo)糖尿

5、病動(dòng)物模型。連續(xù)灌胃OPS-Ia(50，100,200 mg·kg<'-1>)22d，每天記錄小鼠的飲水量和進(jìn)食量，在第一周與第三周記錄小鼠體重。實(shí)驗(yàn)期間分別在1d、11d和22d測(cè)定空腹血糖，末次給藥后測(cè)定小鼠葡萄糖耐量。處死小鼠后取血測(cè)定血脂、血清鈣、尿素氮；取出肝臟測(cè)定SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量、肝糖原、肝葡萄糖-6-磷酸酶活性。 結(jié)果：OPS-Ia能顯著降低鏈佐霉素糖尿病小鼠的血糖、攝食量、飲水量，改善葡萄