鹽酸氨溴索和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)人胎肺Ⅱ型上皮細(xì)胞成熟的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、早產(chǎn)兒發(fā)生新生兒呼吸窘迫綜合征(NRDS)將嚴(yán)重威脅新生兒生命，其主要原因是新生兒肺發(fā)育不成熟，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞不能合成足夠的肺表面活性物質(zhì)(PS)。地塞米松(DEX)被廣泛應(yīng)用于臨床，能夠有效促進(jìn)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞合成、分泌肺表面活性物質(zhì)，誘導(dǎo)胎肺成熟，但其孕周依賴(lài)性以及抑制胎兒生長(zhǎng)和加重母胎感染等副作用已越來(lái)越多地引起關(guān)注。 鹽酸氨溴索(ABX)作為一種快速促排痰藥，除了能促進(jìn)呼吸道粘稠分泌物排出外，近年來(lái)大量研究表明還可促進(jìn)

2、表面活性物質(zhì)的合成和分泌，增加卵磷脂/鞘磷脂比值，也有明顯的促胎肺成熟作用，且與地塞米松相比無(wú)明顯不良反應(yīng)。 本實(shí)驗(yàn)擬聯(lián)合應(yīng)用鹽酸氨溴索與地塞米松作用體外培養(yǎng)的人胎肺Ⅱ型上皮細(xì)胞，并與單一應(yīng)用鹽酸氨溴索或地塞米松組相比較，確定鹽酸氨溴索與地塞米松在體外促胎肺成熟方面是否具有協(xié)同作用。 材料與方法: 1、材料來(lái)源 選擇2006年4月至2006年12月期間，于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院產(chǎn)科病房行腔內(nèi)引產(chǎn)的死亡胎

3、兒12例?；颊呒凹覍偻馑劳鎏菏w由醫(yī)院處理。孕28～34周，胎兒性別不限，取胎兒雙側(cè)肺組織為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。 2、主要試劑 Pereoll、15％FCS-RPMl1640、地塞米松、鹽酸氨溴索等。 3、實(shí)驗(yàn)方法收集的胎肺組織經(jīng)解剖分離和0.25％胰蛋白酶-EDTA消化后，采用密度梯度離心法對(duì)Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞進(jìn)行分離和純化，在15％FCS-RPMl1640培養(yǎng)液、37℃的條件下，培養(yǎng)至細(xì)胞長(zhǎng)成單層。倒置顯微鏡下觀察細(xì)

4、胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，并在透射電子顯微鏡下鑒定Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞。對(duì)培養(yǎng)成功的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分別施加．ABX、DEX和ABX+DEX，并繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，用Bartlett法和改良Lowry法分別測(cè)定用藥后的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞中飽和磷脂和總蛋白的含量，以飽和磷脂/總蛋白比值作為數(shù)據(jù)結(jié)果。 所得到的數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理與分析，t檢驗(yàn)比較總體均數(shù)的差異，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。