rhBMP-4與rhIGF-Ⅰ聯(lián)合應用對人牙周膜成纖維細胞增殖及分化的影響.pdf

1、牙周組織再生的關(guān)鍵是剩余牙周膜細胞的增殖、遷移和向成骨細胞及成牙骨質(zhì)細胞的分化。研究表明，骨形成蛋白-4(BMP-4)屬于TGF-β家族，不僅在骨形成時誘導未分化間充質(zhì)細胞的有絲分裂，增加骨細胞中堿性磷酸酶的活性，而且直接參與調(diào)控牙周膜細胞的遷移、附著、增殖和分化等生物學活動。胰島素樣生長因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)可促進牙周膜成纖維細胞的趨化、有絲分裂和蛋白質(zhì)的合成。為初步探討外源性生長因子在牙周組織再生中的應用潛能，本實驗在體外分離培養(yǎng)牙

2、周膜成纖維細胞(PDLFs)并觀察其成骨的表型特征；探索rhBMP-4及rhIGF-Ⅰ單獨及聯(lián)合應用對人牙周膜成纖維細胞增殖及分化能力影響。本研究分為以下部分： 一.rhBMP-4、rhIGF-Ⅰ對人牙周膜成纖維細胞的增殖和分化影響的濃度效應 方法：體外分離培養(yǎng)人牙周膜成纖維細胞，將人牙周膜成纖維細胞與不同濃度的rhBMP-4、rhlGF-Ⅰ共同培養(yǎng)5d，用MTT法測定人牙周膜成纖維細胞增殖情況，用堿性磷酸酶試劑盒檢測人

3、牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶的活性。 結(jié)果：第3d，rhBMP-4與rhlGF-Ⅰ對人牙周膜成纖維細胞的生長增殖能力及堿性磷酸酶活性的影響與對照組比較均有顯著性差異，且最佳濃度均為10ng/ml。 結(jié)論：rhBMP-4與rhlGF-Ⅰ均對人牙周膜成纖維細胞生長增殖及分化有促進作用。 二.rhBMP-4與rhIGF-Ⅰ聯(lián)合應用對人牙周膜成纖維細胞增殖及分化的影響 方法：將人牙周膜成纖維細胞分別與10 ng/m

4、l rhBMP-4、10ng/ml rhlGF-Ⅰ、10ng/ml rhBMP-4+10ng/ml rhIGF-Ⅰ及無血清DMEM共同培養(yǎng)3d，用MTT法測定人牙周膜成纖維細胞增殖情況，用堿性磷酸酶試劑盒檢測人牙周膜成纖維細胞堿性磷酸酶的活性，用羥脯氨酸試劑盒檢測細胞分泌Ⅰ型膠原的量。 結(jié)果：第3d，10ng/ml rhBMP-4+10ng/ml rhIGF-Ⅰ組，人牙周膜成纖維細胞的生長增殖能力最強，并與其它三組比較有顯著性差