內(nèi)毒素誘發(fā)肉仔雞消化器官損傷及其對TLR4 mRNA表達的影響.pdf

1、本研究選取20日齡三黃肉仔雞為研究對象，隨機分為四組，實驗組A(灌服LPS100mg/Kg)、B(灌服LPS200mg/Kg)、C(灌服LPS300mg/Kg)和對照組D(灌服生理鹽水)。應(yīng)用病理學、生物化學及分子生物學等方法，檢測不同劑量的LPS在不同時間對肉仔雞肝、腸組織以及內(nèi)毒素識別因子肝臟鐘樣受體4(TLR4)mRNA表達的影響，為進一步揭示內(nèi)毒素在幼禽腸道革蘭氏陰性菌感染和細菌易位所引起消化器官損傷的機制提供依據(jù)。 1

2、.內(nèi)毒素對肉仔雞腸、肝形態(tài)變化的影響腸道主要病理變化為腸壁變薄、腸絨毛腫脹，炎性細胞浸潤等；對肝臟主要病理變化為肝細胞變性、淤血以及炎性細胞浸潤等。本實驗結(jié)果表明，低劑量內(nèi)毒素對幼禽影響較小，隨著劑量的增加，其損傷程度加深。 2.內(nèi)毒素對肉仔雞血液生化指標的影響為觀察內(nèi)毒素對肝臟功能的影響，檢測肉仔雞血液生化指標：天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性、直接膽紅素(DBIL)、間接膽紅素(IBIL)。實驗表明不同劑

3、量LPS對實驗雞血液的生化指標有不同程度的影響，結(jié)果如下： 實驗各組血清AST變化：總的趨勢是先升高后回落，其中A組4h、12h和48h與對照組相比差異極顯著(P＜0.01)，而12h后逐漸回落，B組4h、48h和C組4h、12h、48h與對照組比較差異極顯著，(P＜0.01)，B組12h、24h與對照組比較差異顯著。(P＜0.05) 實驗各組血清ALT活性變化：總的趨勢是先升高后降低，其中A組4h和12h與對照組相比差

4、異顯著(P＜0.05)，而12h后逐漸恢復正常，B、C兩組各時間點與對照組相比差異都是極顯著(P＜0.01) 實驗各組血清DBIL含量變化：A、B組呈先升高后降低的趨勢，C組達到峰值后持續(xù)，A組4h和12h以及B、C兩組各時間點與對照組比較差異極顯著(P＜0.01)。實驗各組血清IBIL變化A、B組呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其中A組48h時能恢復至攻毒前的高水平，而B組達峰值后持續(xù)高水平，C組一直處于較高水平。其中A、C組與對照組

5、比較各時間點差異均極顯著(P＜0.01)，B組與對照組比較僅在24h差異顯著(P＜0.05)。 3.內(nèi)毒素對肉仔雞抗氧化酶的影響用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥比色法分別檢測肉仔雞血漿超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平。實驗表明，給肉仔雞喂服不同劑量的內(nèi)毒素后24h內(nèi)可明顯降低小雞血液中SOD的活性，雞體的抗氧化功能失常。結(jié)果如下： 實驗各組血漿SOD活性：實驗雞喂服內(nèi)毒素后，各組均表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢，

6、A組SOD活性于12h降到最低值，以后逐漸回升到接近正常值，B組于各劑量組血漿中SOD活性表現(xiàn)為先降低后升高的變化規(guī)律，灌服內(nèi)毒素后24h顯著降低(P＜0.05)，但于24h后則呈升高趨勢。 實驗各組血漿MDA：實驗雞灌服LPS后，各劑量組血漿中MDA含量表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，不同劑量組之間同一時間點變化幅度隨著劑量的增加而升高，除C組在48h升至最高值外，A組和B組都是在24h升至最高值。 4.內(nèi)毒素對肉仔雞肝臟T