內(nèi)毒素性休克大鼠肺損傷TLR2-4mRNA、GRmRNA表達與調(diào)控.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分、內(nèi)毒素性休克肺損傷大鼠TLR2/4mRNA、GRmRNA表達 目的： 建立內(nèi)毒素休克大鼠肺損傷模型，研究TOLL樣受體(TLR)2/4mRNA、糖皮質(zhì)激素受體(GR)mRNA表達的規(guī)律，以便于尋找合適的干預(yù)手段和時機。 方法： 24只6－8周清潔級SD雄性大鼠(150－200g)隨機分3組，內(nèi)毒素(LPS)6h組(n=8)、LPS24h組(n=8)和對照組(n=8)。

2、尾靜脈注射LPS制作休克模型，分別于注射后6h和24h處死，對照組尾靜脈注射生理鹽水。觀察一般情況，統(tǒng)計注射LPS后6h及24h存活率。留取肺標本，觀察肺組織病理變化，RT-PCR檢測肺TLR2/4mRNA、GRmRNA的表達。以MAP下降50％作為模型制作成功的標志。 結(jié)果： 1．LPS休克模型的建立：注射LPS后，出現(xiàn)嗜睡、心率增快、呼吸加快、四肢末端冷、血壓下降、深大呼吸等休克及缺氧表現(xiàn)，解剖肉眼發(fā)現(xiàn)有肺出血、肺水

3、腫。 2．肺組織病理改變：光鏡和透射電鏡下，LPS組見肺泡間隔彌漫性增寬、炎性細胞浸潤，隔內(nèi)毛細血管不同程度充血，肺泡壁增厚，肺泡腔結(jié)構(gòu)破壞、炎性細胞浸潤、出血、間質(zhì)水腫、細胞器破壞。24較6h病變加重，出現(xiàn)肺實變。 3．TLR2/4mRNA表達：注射LPS后6h和24h，肺組織TLR2/4mRNA表達均升高，較對照組均有顯著差異(P＜0.05)。 4．GRmRNA的表達：注射LPS后6hGRmRNA表達下降，與

4、對照組比有顯著差異(P＜0.05)；24h恢復(fù)正常水平，6h組和24h組比較有顯著差異(P＜0.05)。 結(jié)論： LPS休克致肺損傷時，肺組織TLR2/4mRNA表達增強，GRmRNA表達早期下降，24h恢復(fù)。 第二部分、血管活性腸肽和糖皮質(zhì)激素對內(nèi)毒素休克大鼠肺的保護研究 目的： 探討血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)對LPS休克大鼠肺損傷的TLR

5、2/4mRNA表達的影響；探討糖皮質(zhì)激素(GC)對LPS休克大鼠肺組織TLR2/4mRNA與GRmRNA表達的影響；探討VIP和GC對抗LPS休克大鼠肺損傷的相互作用。 方法： 56只6－8周清潔級SD雄性大鼠(150－200g)隨機分4組，LPS休克組(n=16)、LPS+VIP組(n=16)、LPS+VIP+GC組(n=16)和對照組(n=8)，尾靜脈注射LPS制作休克模型，尾靜脈注射LPS10mg/kg后，15mi

6、n注射VIP、甲基強的松龍，對照組注射等容量生理鹽水，分別于注射后6h和24h處死，留取肺標本，觀察肺組織病理變化，RT-PCR檢測肺組織TLR2/4mRNA、GRmRNA的表達。 結(jié)果： 1．肺組織病理改變：對照組肺組織結(jié)構(gòu)完整；LPS組見肺泡腔結(jié)構(gòu)破壞、肺泡間隔增寬、炎性細胞浸潤、出血、間質(zhì)水腫、細胞器破壞；LPS+VIP組和LPS+VIP+GC組病變較輕。 2． TLR2/4mRNA：6h時TLR4mRNA

7、表達比LPS組增強，有顯著差異(P＜0.05)。24h時LPS+VIP組TLR2/4mRNA表達低于LPS組(P＜0.05)；24h時LPS+VIP+GC組TLR2/4mRNA表達亦低于LPS組(P＜0.05)。 3．GRmRNA：注射LPS后6hGRmRNA表達下降，與對照組比有顯著差異(P＜0.05)，24h恢復(fù)正常水平；LPS+VIP組GRmRNA表達6h降低，與對照組比較有顯著差異(P＜0.05)，與LPS組6h比較略高