葛根素溫度敏感及粘膜附著型眼用即位凝膠遞藥體系的研制.pdf

1、應(yīng)用于眼睛表面的藥物治療主要有兩個(gè)目的：治療眼表疾病，如結(jié)膜炎、眼瞼炎、干性角膜炎；或者是穿過角膜對眼球內(nèi)的疾病進(jìn)行治療，如青光眼、眼色素層炎。大多數(shù)的眼病采取局部的溶液劑型治療，如滴眼劑。當(dāng)前市場上這類傳統(tǒng)的劑型約有90％左右是易被人們接受的。局部的眼部給藥存在的主要問題是由于引流和淚液稀釋沖洗導(dǎo)致角膜前的快速的、大量的損失。局部給予眼用藥物溶液后，藥物首先與淚液混合。因?yàn)檠劬δ芎愣ǖ禺a(chǎn)生淚液（0.5-2.2ul/min），藥物與眼組

2、織的接觸時(shí)間相對地來說比較短（1-2min），大約有一半的藥物流進(jìn)上面的小管，而另一半則流進(jìn)下面的小管進(jìn)入淚囊，淚囊開口于鼻淚管，在眨眼的時(shí)候流淚引流進(jìn)入鼻淚管，使傳統(tǒng)劑型的藥物迅速消除。藥物經(jīng)結(jié)膜吸收以及被引流后經(jīng)由鼻淚管經(jīng)鼻吸收都是我們所不希望的。為了增加生物利用度，延長藥物治療作用，眼用藥物劑型在設(shè)計(jì)上應(yīng)該包括兩個(gè)范疇：首先應(yīng)用給藥體系，保證眼用藥物的控、緩釋放。第二，提高藥物的角膜吸收，減小藥物的角膜前損失。
　　 目的

3、：本文以葛根素為模型藥物，從研究提高藥物角膜前滯留時(shí)間入手，制備具有適宜相轉(zhuǎn)變溫度的溫度敏感及粘膜附著型眼用即位凝膠。應(yīng)用流變學(xué)方法表征凝膠過程，研究凝膠中藥物的釋放規(guī)律，并對溫度敏感及粘膜附著型即位凝膠眼部應(yīng)用后的房水和淚液藥物動(dòng)力學(xué)及生物利用度進(jìn)行研究。
　　 方法：
　　 （1）方法學(xué)考察：根據(jù)藥典方法，確定了葛根素的測定方法，并對精密度和穩(wěn)定性等方面進(jìn)行了考察。
　　 （2）處方篩選：在文獻(xiàn)基礎(chǔ)上，確定以

4、泊洛沙姆F-127和188、透明質(zhì)酸鈉、卡波姆1342為主要基質(zhì)，以經(jīng)人工淚液稀釋前后的膠凝溫度為指標(biāo)對處方進(jìn)行篩選，并以泊洛沙姆F-127、188、卡波姆1342的用量、pH為考察因素，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，按L9（4）3正交表安排實(shí)驗(yàn)，得到最佳處方，同時(shí)保留單因素考察時(shí)比較理想的處方進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)。
　　 （3）體外釋放研究：采用無膜溶蝕法、離體角膜透皮擴(kuò)散法、溶出儀法，以人工淚液為溶出介質(zhì)，溫度34.5±1℃，在規(guī)定的時(shí)間點(diǎn)

5、取樣，累積釋放度分別以Highchi、零級(jí)和一級(jí)方程進(jìn)行擬合，分別考察凝膠的溶蝕及藥物的釋放動(dòng)力學(xué)，對藥物的釋放機(jī)理進(jìn)行研究。
　　 （4）穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：對實(shí)驗(yàn)得出的最佳處方進(jìn)行強(qiáng)光照射、加速實(shí)驗(yàn)，觀察凝膠的外觀，測定含量，考察穩(wěn)定性。
　　 （5）家兔眼部刺激性和毒性考察：
　　 刺激性試驗(yàn)：以生理鹽水為對照組，采用同體左右側(cè)自身對比法，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)對單次和多次給藥對兔眼的刺激性癥狀進(jìn)行檢查，并對記錄結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)

6、。
　　 毒性試驗(yàn)：健康新西蘭白兔6只，隨機(jī)分成兩組，一組右眼給予葛根素即位凝膠，左眼給予生理鹽水作對照；另一組右眼給予葛根素滴眼劑，左眼給予生理鹽水作對照。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，摘除眼球，做組織切片，電鏡檢查。
　　 （6）體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究：以新西蘭白兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采用隨機(jī)分組法進(jìn)行分組，分別給予葛根素即位凝膠（實(shí)驗(yàn)組）和葛根素滴眼劑（對照組），不同時(shí)間的取樣，高效液相色譜法測定淚液和房水中藥物的含量，評(píng)價(jià)制劑的生物利用度。

7、
　　 結(jié)果：（1）方法學(xué)考察：通過對精密度和穩(wěn)定性等方面進(jìn)行考察，確定藥典方法為葛根素的含量測定方法。
　　 （2）處方篩選：以經(jīng)人工淚液稀釋前后的膠凝溫度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對處方進(jìn)行篩選，得到溫度敏感及粘膜附著型即位凝膠的最佳處方為：1％葛根素、28％泊洛沙姆F.127、1％泊洛沙姆188、0.1％透明質(zhì)酸鈉、0.3％卡波姆1342、pH6.5的磷酸鹽緩沖液。制劑經(jīng)人工淚液稀釋前后的膠凝溫度分別為：28±1℃和32±1℃。

8、
　　 （3）體外釋放研究：無膜溶蝕法、離體角膜透皮擴(kuò)散法中各處方均符合零級(jí)方程，分別為：滴眼劑Q=0.051lt-1.1356，r=0.9988：凝膠處方1為Q=0.0343t-0.0814，r=0.9963；凝膠處方2為Q=0.0306t-0.0337，r=0.9964。無膜溶蝕法累積釋放度及藥物累積溶蝕度分別符合零級(jí)方程：Q=3010.6t+2567.6，r=0.9989和Q=0.429t-0.0559，r=0.9984。

9、漿法溶出度法的累積釋放度對時(shí)間曲線易更符合零級(jí)方程，為Q=1.2944t+6.0242，r=0.9896.
　　 （4）穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：制劑經(jīng)強(qiáng)光照射、加速實(shí)驗(yàn)后，凝膠的外觀無變化，含量穩(wěn)定。日內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果，淚液中葛根素的RSD為1.91％；房水中葛根素的RSD為2.82％。日間精密度結(jié)果，淚液中葛根素的RSD為1.68％；房水中葛根素的RSD為1.04％。
　　 （5）家兔眼部刺激性和毒性考察：
　　 刺激性試

10、驗(yàn)：單次和多次給藥刺激性試驗(yàn)結(jié)果表明對兔眼均無明顯影響，雙眼角膜透明，無混濁，虹膜紋理清晰，結(jié)膜無充血，無水腫，無分泌物。
　　 毒性試驗(yàn)：組織切片電鏡檢查結(jié)果顯示，對照組和實(shí)驗(yàn)組無明顯變化，組織結(jié)構(gòu)完整，未見新生血管。
　　 （6）體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究：將測得的淚液中藥物含量數(shù)據(jù)，用DAS藥代動(dòng)力學(xué)程序進(jìn)程處理，得兩制劑各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，
　　 Compartment parameter Eye drop In

11、-situ gel
　　 t1/2（min）27.9866931.472
　　 Ke（1/min）0.0250
　　 W1/F（L/kg）0.0091.331
　　 CL/F（L/min/kg）00
　　 AUC（0-t）（μg/L*min）86250.7145537.205
　　 AUC（0-∞）（μg/L*min）90458.295150263.21
　　 Ka（1/min）0

12、.0520.056
　　 t1/2Ka（min）13.33512.414
　　 Tlag（min）22.05265.762實(shí)驗(yàn)組中t1/2、AUC（0-∞）、AUC（0-t）值均明顯高于對照組。
　　 結(jié)論：以上各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，實(shí)驗(yàn)所得眼用即位凝膠延長了葛根素在眼部的滯留時(shí)間，眼部刺激性小、耐受性好，無明顯的眼部毒性反應(yīng)。因此，葛根素眼用即位凝膠可明顯延長藥物在眼部的滯留時(shí)間，提高藥物的生物利用度，展現(xiàn)出良好的