芍藥苷誘導(dǎo)子宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡的相關(guān)研究.pdf

1、目的:宮頸癌是全球婦女中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌。據(jù)國(guó)際癌癥研究中心估計(jì)，2002年全世界有493000例新發(fā)病例，274000例死亡病例，其中83％的宮頸癌發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。近年來(lái)宮頸癌發(fā)病逐漸出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)，腺癌比例也有所上升。隨著富頸癌發(fā)病年輕化及患者對(duì)治療后生活質(zhì)量要求的提高，化療已由晚期姑息治療轉(zhuǎn)為有效的綜合治療。因此尋找高效低毒藥物是提高化療成功率和患者生存率、改善患者生活質(zhì)量的關(guān)鍵。
　　 天然中草藥因其

2、低毒高效特點(diǎn)已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外抗癌藥物研發(fā)的熱點(diǎn)，芍藥苷是一種天然單萜類糖苷化合物，是傳統(tǒng)中藥赤芍的主要有效成分，具有抗炎、神經(jīng)保護(hù)、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)免疫等多種生物學(xué)效應(yīng)，新近藥理研究表明芍藥苷具有潛在的抗腫瘤作用。然而其有無(wú)抗宮頸腫瘤效應(yīng)及其作用機(jī)制尚不清楚。本研究通過(guò)體外培養(yǎng)人宮頸癌HeLa細(xì)胞，觀察芍藥苷對(duì)HeLa細(xì)胞增殖和凋亡作用的影響，為臨床應(yīng)用芍藥苷治療宮頸癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 實(shí)驗(yàn)材料及方法:不同濃度芍藥苷作用于人宮頸癌H

3、eLa細(xì)胞后，采用MTT法檢測(cè)不同時(shí)間HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)，計(jì)算出藥物的半量抑制濃度(IC50)，據(jù)此確定芍藥苷適當(dāng)濃度用于細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)調(diào)控基因?qū)嶒?yàn)。膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素(FITC)／碘化丙啶(PI)雙染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HeLa細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期變化，透射電鏡觀察HeLa細(xì)胞形態(tài)變化，免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)芍藥苷作用后HeLa細(xì)胞Bc1-2、Bax及Caspase-3表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:不同濃度的芍藥苷作用

4、不同時(shí)間后，對(duì)子宮頸癌HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率呈明顯的濃度-時(shí)間依賴關(guān)系，在24、48、72h的IC50值分別為5054、2965、2459μg/ml;應(yīng)用不同濃度芍藥苷后HeLa細(xì)胞凋亡率逐漸增高，對(duì)照組及1000、2000μg/ml組凋亡率分別為0.94％、10.94％、13.95％，細(xì)胞周期S期比例呈增多趨勢(shì)；芍藥苷作用48h后透射電鏡下可見(jiàn)HeLa細(xì)胞出現(xiàn)典型凋亡改變；芍藥苷作用于HeLa細(xì)胞48h后，與對(duì)照組相比Bcl-2表達(dá)