人子宮頸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞放射治療后的基因改變.pdf

1、研究背景及目的：子宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)第一大惡性腫瘤，放射治療是其主要治療方法之一。在臨床上，即使相同病理類型和分期的患者接受放射治療后可能有截然不同的效果，這與該患者腫瘤的放療敏感性有關(guān)。而腫瘤的放射治療敏感性不但取決于腫瘤細(xì)胞本身的放療敏感性，也與周圍血供密切相關(guān)。目前越來越多的研究關(guān)注腫瘤放射治療過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞的變化，多數(shù)研究認(rèn)為內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率影響放射治療的敏感性，然而對人子宮頸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的放射治療相關(guān)基因的報道甚少。因

2、此，對于相關(guān)基因表達(dá)及分子機(jī)制的研究可能為腫瘤治療提供新的依據(jù)。我們研究的目的是通過對X線照射后人子宮頸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)譜的研究，篩選出與放療過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及腫瘤血供相關(guān)的基因，為子宮頸癌治療提供新的途徑。
　　研究方法：在無菌條件下分別于X線照射前及照射后提取8例擬行放療的子宮頸鱗狀上皮癌患者的宮頸癌組織，針芯研磨制成單細(xì)胞懸液，通過免疫磁珠結(jié)合技術(shù)提取原代子宮頸血管內(nèi)皮細(xì)胞。通過22K人類基因組寡核苷酸微陣列設(shè)備

3、（22K Human Genome Oligonucleotide Microarray Kit）篩查顯著改變的基因。隨機(jī)選擇4個持續(xù)改變的基因通過實(shí)時熒光定量PCR和Western Blot進(jìn)行驗(yàn)證。
　　研究結(jié)果：通過磁珠標(biāo)記的原代子宮頸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞特點(diǎn)包括接觸性抑制現(xiàn)象和呈現(xiàn)鋪路石樣外觀，并通過免疫熒光技術(shù)進(jìn)行鑒定。臺盼藍(lán)活力拒染率為90％。子宮頸癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離純度為95%。與對照組相比，66個基因持續(xù)改變（≥2倍）

4、，其中36個基因上調(diào)，30個基因下調(diào)，這些基因參與細(xì)胞周期的調(diào)控、細(xì)胞粘附、免疫反應(yīng)、趨化因子、炎癥反應(yīng)、生長因子、血管生成、DNA合成與修復(fù)和蛋白質(zhì)合成等。實(shí)時熒光定量 PCR和 Western Blot的結(jié)果與基因芯片結(jié)果一致。
　　研究結(jié)論：1.X線照射子宮頸癌的血管內(nèi)皮細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)持續(xù)改變的基因；2.顯著改變的基因參與細(xì)胞周期、細(xì)胞粘附、免疫應(yīng)答、趨化因子、炎癥反應(yīng)、生長因子、血管生成、DNA合成及修復(fù)和蛋白質(zhì)合成，與Che