咳喘停穴位貼敷對(duì)哮喘緩解期大鼠INF-γ等哮喘抑制炎癥因子的影響.pdf

1、目的:觀察咳喘停穴位貼敷治療支氣管哮喘對(duì)IFN-γ、IL-2、IL-12表達(dá)的影響，探討咳喘停穴位貼敷治療哮喘對(duì)以Th1/Th2為核心的下游調(diào)控因素的免疫調(diào)節(jié)的作用機(jī)制，為臨床預(yù)防和緩解支氣管哮喘復(fù)發(fā)提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　SPF級(jí)6周齡wistar雄性大鼠48只，體重160±20g，稱重后隨機(jī)分成6組，分別為:正常組(A)、哮喘模型組(B)、地塞米松組(C)、假穴位貼敷組(D)、穴位貼敷組(E)、布地奈德組(F)。

2、每組8只大鼠。制備卵蛋白(OVA)慢性過(guò)敏性哮喘大鼠模型。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。首次接受致敏注射為第1天，前兩周為致敏階段。第15天到第56天為持續(xù)激發(fā)階段（6周）。致敏階段:第1天予B、C、D、E、F組大鼠腹腔注射OVA和氫氧化鋁混合溶液1ml（含OVA10mg、氫氧化鋁100mg），第8天再次腹注加強(qiáng)致敏。激發(fā)階段:第15天開(kāi)始，將B、C、D、E、F組大鼠放于自備密閉霧化箱內(nèi)，予1％OVA溶液超聲霧化，隔天1次，每次30min。觀察大

3、鼠咳嗽、喘息等反應(yīng)。直到第56天霧化結(jié)束。第57天起對(duì)C、D、E、F組進(jìn)行治療處理。A、B組:正常喂養(yǎng)不做其它處理。C組:地塞米松1mg/kg/天，腹腔注射，共治療14天。D組:凡士林貼劑外用于雙側(cè)肺俞、脾俞、腎俞穴，6小時(shí)后去除，每日1次，共治療14天。E組:咳喘停貼劑外用于雙側(cè)肺俞、脾俞、腎俞穴，6小時(shí)后去除，每日1次，共治療14天。F組:布地奈德霧化吸入以20ml霧化吸入10min/天，共治療14天。
　　結(jié)果:
　　

4、(1)哮喘大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)
　　正常組大鼠活動(dòng)正常，呼吸平穩(wěn)，無(wú)喘促等表現(xiàn);哮喘模型大鼠表現(xiàn)為豎毛、毛發(fā)暗淡，倦怠。霧化激發(fā)時(shí)大鼠出現(xiàn)典型哮喘樣發(fā)作，表現(xiàn)為呼吸急促，張口喘息，噴嚏，口唇發(fā)紺，前肢縮抬，點(diǎn)頭呼吸，腹部翕動(dòng)及行動(dòng)遲緩等，并隨著激發(fā)次數(shù)增加癥狀逐步加重，霧化后期大鼠活動(dòng)明顯減少;表明大鼠模型初步具備哮喘特征。
　　(2)大鼠肺組織病理（HE染色）改變
　　在HE染色的支氣管肺組織切片中可以觀察到:（各組照片

5、見(jiàn)附錄）
　　A正常組:細(xì)支氣管上皮完整、形態(tài)規(guī)則，肺泡隔及血管壁周?chē)猩倭垦仔约?xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)支氣管腔分泌物很少，管壁纖維結(jié)締組織及平滑肌未見(jiàn)增生，肺泡形態(tài)規(guī)則。
　　B模型組:肺泡內(nèi)見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管黏膜水腫、分泌物增多、管腔變窄、腔內(nèi)見(jiàn)粘液栓，部分支氣管內(nèi)皺褶減少伴部分上皮脫落，支氣管壁及管周見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管壁增厚。
　　C地塞米松組:與模型組相比，支氣管腔內(nèi)粘液栓減少，粘膜上皮完整，肺間隔未見(jiàn)明顯增厚，

6、支氣管壁少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，管壁纖維結(jié)締組織及平滑肌未見(jiàn)明顯增生。
　　D假穴位貼敷組:與模型組相似，肺泡內(nèi)見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管黏膜水腫、分泌物增多、管腔變窄、腔內(nèi)見(jiàn)粘液栓，部分支氣管內(nèi)皺褶減少伴部分上皮脫落，支氣管壁及管周見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管壁增厚。
　　E穴位貼敷組:與模型組相比，支氣管腔內(nèi)粘液栓減少，粘膜上皮完整，肺間隔有較少炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、未見(jiàn)明顯增厚，支氣管管壁纖維結(jié)締組織及平滑肌

7、未見(jiàn)明顯增生。
　　F布地奈德組:與模型組相比，支氣管腔內(nèi)粘液栓減少，粘膜上皮完整，肺間隔未見(jiàn)明顯增厚，支氣管壁少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，管壁纖維結(jié)締組織及平滑肌未見(jiàn)明顯增生。(3)①I(mǎi)FN-γ含量測(cè)定結(jié)果:模型組、假穴位貼敷組肺泡灌洗液中IFN-γ含量明顯低于正常對(duì)照組，有顯著性差異(P＜0.05);與假穴位貼敷對(duì)照組相比，穴位貼敷治療組肺泡灌洗液中IFN-γ含量升高，地塞米松治療組、布地奈德霧化治療組與模型組對(duì)比有升高IFN-γ含量的

8、趨勢(shì)但無(wú)顯著性差異。穴位貼敷治療組IFN-γ含量與地塞米松治療組、布地奈德霧化治療組無(wú)明顯差異。
　?、贗L-2含量測(cè)定結(jié)果:模型組、假穴位貼敷對(duì)照組肺泡灌洗液中IL-2含量明顯低于正常對(duì)照組，有顯著性差異(P＜0.05);與假穴位貼敷組相比，穴位貼敷治療組肺泡灌洗液中IL-2含量升高的趨勢(shì)，地塞米松治療組、布地奈德霧化治療組與模型組對(duì)比有升高IL-2含量的趨勢(shì)。穴位貼敷治療組IL-2含量與地塞米松治療組、布地奈德霧化治療組無(wú)明顯

9、差異。
　?、跧L-12含量測(cè)定結(jié)果:假穴位貼敷組肺泡灌洗液中IL-12含量明顯低于正常對(duì)照組，有顯著性差異(P＜0.05);與假穴位貼敷組相比，地塞米松治療組、布地奈德霧化治療組有升高IL-12含量的作用(P＜0.05)，但穴位貼敷治療組與假穴位貼敷組比肺泡灌洗液中IL-12含量升高但無(wú)顯著差異。
　　結(jié)論:從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來(lái)看，喘咳停穴位貼敷可提高實(shí)驗(yàn)性哮喘大鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-12的水平，提示穴位貼敷對(duì)哮喘