2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩56頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、全球目前約有3.6億慢性乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染者,其中約有10%左右發(fā)展為肝硬化甚至肝癌,每年死于HBV所致疾病人數(shù)在50萬到120萬。免疫系統(tǒng)在HBV慢性感染的病程和轉(zhuǎn)歸中起著至關(guān)重要的作用,慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)患者體內(nèi)免疫功能異常,抗HBV特異性細胞免疫功能低下,主要表現(xiàn)為抗病毒相關(guān)的細胞因子分泌低下及病毒在體內(nèi)的持續(xù)存在。近期研究表明,程序性死亡蛋白-1(p

2、rogrammeddeath-1,PD-1)及其配體(B7-H1,即PD-L1)與感染的慢性化有關(guān),阻斷PD-1與其配體B7-H1(PD-L1)的結(jié)合,可增強T細胞的抗病毒作用。本研究擬通過體內(nèi)阻斷PD-1/PD-L1途徑,改善HBsAg免疫刺激HBV轉(zhuǎn)基因小鼠抗HBV免疫功能,為治療慢性乙型肝炎探尋新方法。
  目的:
  應(yīng)用HBV轉(zhuǎn)基因小鼠動物模型,觀察B7-H1蛋白疫苗免疫后對PD-1/PD-L1的阻斷效果及其是否能

3、夠增強對HBsAg的免疫應(yīng)答。
  方法:
  ①15只HBVTg雌性小鼠隨機分為HBsAg組、重組人B7-H1聯(lián)合HBsAg組、生理鹽水對照組。②HBsAg組每只小鼠腹腔注射HBsAg200μL(含HBsAg10μg);B7-H1聯(lián)合HBsAg組腹腔注射HBsAg(含HBsAg10μg)及重組人B7-H1(含B7-H140μg),終體積為200μl;生理鹽水對照組腹腔注射200μL生理鹽水;各組小鼠每兩周免疫/注射1次,共

4、4次,末次免疫后2周處死小鼠取脾。③3組小鼠均在免疫前1天及免疫后2、4、6、8周經(jīng)眶后靜脈叢穿刺采血,每次采血0.3~0.5mL,高速離心(13000r/min,10min)后收集上清置-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。④記?組小鼠免疫前體重、HBsAg定量,比較各組之間有無差異。⑤應(yīng)用ELISA方法檢測B7-H1蛋白疫苗免疫后2、4、6、8周血清抗體滴度。⑥應(yīng)用HBsAbELISA試劑盒檢測各試驗組產(chǎn)生抗乙肝病毒表面抗原抗體(抗-HBs)的水

5、平。⑦按常規(guī)制備脾細胞懸液,應(yīng)用HBsAg刺激后觀察各組脾細胞產(chǎn)生IL-2和IFN-γ的量。⑧應(yīng)用ELISPOT試劑盒檢測各實驗組小鼠分泌HBsAg特異性IFN-γT細胞的數(shù)量。⑨用MTT法檢測各組淋巴細胞增殖功能。⑩在統(tǒng)計學軟件SPSS中分析數(shù)據(jù),數(shù)據(jù)均以?x±s表示,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
  結(jié)果:
  ①3組Tg小鼠的平均體重分別為27.2±0.96g、26.6±0.55g、27.1±0.752g;3組小

6、鼠免疫前血清HBsAg滴度分別為5307.9±437.8IU/mL、5335.4±523.5IU/mL和5554.8±439.5IU/mL;3組小鼠無論是體重還是免疫前HBsAg滴度均未見明顯差異。②B7-H1蛋白疫苗免疫小鼠后,血清抗體滴度隨免疫次數(shù)的增加而升高,并可維持較高的滴度。③免疫治療6周、8周,HBsAg組及HBsAg+B7-H1組均100%出現(xiàn)表面抗原抗體,對照組始終為陰性,但HBsAg組及HBsAg+B7-H1組兩組之間

7、抗體滴度無明顯差異(P>0.05)。④HBsAg組及HBsAg+B7-H1組所誘生的Th1類細胞因子(IL-2、IFN-γ)的水平與生理鹽水對照組相比明顯增高(P<0.05),IL-2分別為306.7±94.8pg/ml、327.9±109.6pg/ml、124.5±55.7pg/ml,IFN-γ分別為569.0±132.1pg/ml、647.8±161.8pg/ml、99.2±50.2pg/ml,但HBsAg組及HBsAg+B7-H1

8、組之間無顯著性差異(P>0.05)。⑤HBsAg單獨免疫及HBsAg+B7-H1聯(lián)合免疫組小鼠脾細胞HBsAg特異性分泌IFN-γT細胞數(shù)量較生理鹽水對照組增加近1倍(P<0.05),分別為57.8±5.4、52.4±4.5、23.6±3.6,但HBsAg與HBsAg+B7-H1兩組間無明顯差異(P>0.05)。⑥淋巴細胞特異性增殖試驗中,HBsAg組及HBsAg+B7-H1組刺激指數(shù)(SI)明顯高于生理鹽水對照組,分別為2.29±0.

9、30、2.30±0.36和1.33±0.26,且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而HBsAg組與HBsAg+B7-H1組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
  結(jié)論:
  1、HBsAg可以誘導(dǎo)乙肝轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生特異性的體液免疫,并可誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平Th1類細胞因子(IL-2、IFN-γ),打破免疫耐受。
  2、應(yīng)用B7-H1蛋白疫苗阻斷PD-1/PD-L1對HBsAg在HBV轉(zhuǎn)基因小鼠中的免疫效果無明顯影響,但仍需

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論