ERK在腦缺血耐受誘導(dǎo)中的作用及疏血通脈膠囊預(yù)處理對其的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的:研究細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶( extracellular signa1- regulated kinases,ERK)在腦缺血耐受誘導(dǎo)中的作用,并觀察疏血通脈膠囊預(yù)處理對其的調(diào)控作用。探討疏血通脈膠囊預(yù)處理所誘導(dǎo)的內(nèi)源性神經(jīng)元保護(hù)機(jī)制及作用靶點(diǎn),闡述中醫(yī)“中風(fēng)病”未病先防、既病防變的“治未病”理論的科學(xué)內(nèi)涵。
　　方法:成年雄性SD大鼠96只,按照計算機(jī)產(chǎn)生的隨機(jī)序列,將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌組、預(yù)缺血組、疏血通脈組,每

2、組24只;每組大鼠分別于術(shù)后3h、6h、24h、72 h時間點(diǎn)再隨機(jī)分為4個亞組,每亞組6只大鼠。預(yù)缺血組先對大鼠進(jìn)行3分鐘腦缺血預(yù)處理,誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生腦缺血耐受,24小時后建立大鼠腦缺血再灌注模型;缺血再灌組和疏血通脈組不予缺血預(yù)處理,直接建立大鼠腦缺血再灌注模型;假手術(shù)組大鼠只分離血管,不予插線。應(yīng)用免疫印跡法檢測ERK以及磷酸化的ERK(phosphorylation extracellular-signal regulated k

3、inas,P-ERK)在大鼠腦缺血預(yù)處理模型中的表達(dá)情況,并與假手術(shù)組、腦缺血再灌注組、疏血通脈膠囊組的表達(dá)水平進(jìn)行比較。應(yīng)用Tunel法檢測神經(jīng)元凋亡數(shù)量,觀察ERK、P-ERK的表達(dá)水平與神經(jīng)元凋亡數(shù)量以及神經(jīng)功能缺損情況的相關(guān)性。
　　結(jié)果:假手術(shù)組大鼠各個時間點(diǎn)均未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損,其余三組大鼠于3h時間點(diǎn)時均出現(xiàn)了不同程度的神經(jīng)功能缺損,并逐漸加重,于24h達(dá)到高峰。預(yù)缺血組、疏血通脈組各時間點(diǎn)神經(jīng)功能缺損均輕于缺血再灌

4、注組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),預(yù)缺血組神經(jīng)功能缺損情況與疏血通脈組相比,各時間點(diǎn)均無統(tǒng)計學(xué)差異意義(P>0.05)。缺血再灌組、預(yù)缺血組以及疏血通脈組從3h時即出現(xiàn)ERK的明顯激活(表現(xiàn)為P-ERK表達(dá)水平上調(diào),P-ERK/ERK比值增大),并逐漸升高,并于24h達(dá)到高峰,各時間點(diǎn)與假手術(shù)組相比均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。預(yù)缺血組、疏血通脈組各時間點(diǎn)磷酸化水平均高于缺血再灌注組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。各

5、時間點(diǎn)預(yù)缺血組P-ERK/ERK與疏血通脈組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各時間點(diǎn),假手術(shù)組可偶見極少量凋亡細(xì)胞,但無神經(jīng)功能缺損;缺血再灌組、預(yù)缺血組以及疏血通脈組隨著腦缺血再灌注時間的延長,凋亡數(shù)量逐漸增加,神經(jīng)功能缺損情況逐漸加重,并于24h時達(dá)到高峰。預(yù)缺血組與疏血通脈組各時間點(diǎn)細(xì)胞凋亡數(shù)量均較模型組少,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);預(yù)缺血組與疏血通脈組各時間點(diǎn)細(xì)胞凋亡數(shù)量比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。