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文檔簡(jiǎn)介
1、從供、受體細(xì)胞準(zhǔn)備,重構(gòu)胚構(gòu)建與體外培養(yǎng)、妊娠到胎兒出生,核移植的效率受諸多因素的制約,其中供體細(xì)胞體外培養(yǎng)是影響體細(xì)胞核移植胚胎發(fā)育的一個(gè)重要方面。為了建立穩(wěn)定的牛體細(xì)胞體外培養(yǎng)方法,本實(shí)驗(yàn)對(duì)牛耳皮膚成纖維細(xì)胞、牛卵巢顆粒細(xì)胞和牛輸卵管上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法進(jìn)行了研究,并對(duì)他們的生長(zhǎng)特性作了探討。 研究結(jié)果表明: 1.DMEM及1640兩種培養(yǎng)液均適合牛耳皮膚的組織培養(yǎng),M199不適宜牛耳皮膚組織體外培養(yǎng)。
2、 2.冷消化、熱消化和冷熱結(jié)合消化法均能從牛耳皮膚組織塊獲得較多的成纖維細(xì)胞,冷熱結(jié)合消化法較其它兩種消化法可以獲得更多的細(xì)胞數(shù)和更高的細(xì)胞貼壁率。 3.采用消化培養(yǎng)法、組織塊培養(yǎng)法和消化組織培養(yǎng)法三種方法研究不同培養(yǎng)方法對(duì)傳代牛耳成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,消化組織培養(yǎng)法較其它兩種方法能獲得較高的細(xì)胞貼壁率、活細(xì)胞率和較短的培養(yǎng)周期,是一種較好的牛耳成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法。 4.37℃,0.25%胰酶+0.02%EDTA
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