應(yīng)用活體流式細(xì)胞儀和活體成像技術(shù)對肝癌進(jìn)展與轉(zhuǎn)移的監(jiān)測及療效評估研究.pdf

1、癌癥是威脅人類健康的最大敵人之一，肝癌的發(fā)病率和死亡率更是在所有的癌癥中名列前茅。雖然隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，肝癌的治療得到了改善，但是轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)仍然是難以克服的巨大障礙。腫瘤轉(zhuǎn)移包括原發(fā)部位腫瘤侵入血管形成循環(huán)腫瘤細(xì)胞，循環(huán)腫瘤細(xì)胞通過血液循環(huán)播散到其他組織和器官，循環(huán)腫瘤細(xì)胞在滯留和歸巢到靶器官后進(jìn)而生長形成轉(zhuǎn)移灶三個主要過程。在這一過程中，循環(huán)腫瘤細(xì)胞是影響腫瘤轉(zhuǎn)移最為關(guān)鍵的因素之一，其已經(jīng)成為腫瘤惡性程度診斷和預(yù)后判定的重要依據(jù)。而

2、活體流式細(xì)胞儀作為新興的活體檢測技術(shù)，可以實時動態(tài)的定量反映循環(huán)腫瘤細(xì)胞的變化情況，結(jié)合其他活體成像技術(shù)可以實現(xiàn)對整個腫瘤生長、轉(zhuǎn)移過程的動態(tài)追蹤。在我的研究中，我們構(gòu)建了熒光蛋白轉(zhuǎn)基因標(biāo)記的高轉(zhuǎn)移性肝癌腫瘤模型。同時我們還構(gòu)建了結(jié)合先進(jìn)的活體流式細(xì)胞儀、活體共聚焦顯微鏡、活體小動物光學(xué)成像系統(tǒng)、活體小動物超聲成像系統(tǒng)等技術(shù)的多層次、多尺度、定性與定量相結(jié)合的腫瘤轉(zhuǎn)移檢測系統(tǒng)。通過動物模型與檢測系統(tǒng)的結(jié)合，我們實現(xiàn)了對肝癌腫瘤生長、轉(zhuǎn)移

3、情況的全面追蹤。進(jìn)而，我們又比較了肝癌原位瘤轉(zhuǎn)移模型與皮下瘤轉(zhuǎn)移模型在腫瘤的生長、發(fā)展和轉(zhuǎn)移情況上存在的差異。我們發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境的差異會導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移特征的顯著差異，并證明原位瘤模型作為貼近臨床狀態(tài)的動物模型，更適用于腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)研究。之后，基于肝癌原位瘤轉(zhuǎn)移模型，我們又分別對兩種腫瘤治療方法（肝腫瘤手術(shù)切除治療和索拉非尼藥物治療）對腫瘤生長、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的影響進(jìn)行了監(jiān)測，評估治療方法的療效。在手術(shù)切除治療中，我們發(fā)現(xiàn)原位瘤的切除可以通過

4、切斷循環(huán)腫瘤細(xì)胞供給，有效地減少循環(huán)腫瘤細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而減少肺部早期轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量，延緩進(jìn)展期轉(zhuǎn)移灶數(shù)量的增加，起到積極的效果。在索拉非尼藥物治療中，我們發(fā)現(xiàn)索拉非尼可以通過抑制腫瘤生長和新生血管生成，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和壞死，從而有效地減少循環(huán)腫瘤細(xì)胞和肺部轉(zhuǎn)移的數(shù)量，起到積極的治療效果。同時，綜合之前的結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的數(shù)量與原發(fā)部位腫瘤的體積呈相關(guān)性，肺轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量與循環(huán)腫瘤細(xì)胞的數(shù)量呈相關(guān)性，暗示循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)量作為獨立臨