枸杞多糖對(duì)丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察枸杞多糖對(duì)丙烯酰胺致雄性小鼠的生殖毒性作用的拮抗作用，初步探討枸杞多糖對(duì)丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的拮抗機(jī)制。
　　方法：健康雄性昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為5組，每組12只，分為正常組：生理鹽水；模型組：丙烯酰胺100mg/(kg.d)；高劑量拮抗組：丙烯酰胺100mg/(kg.d)+枸杞多糖（200mg/kg.d）；中劑量拮抗組：丙烯酰胺100mg/(kg.d)+枸杞多糖（100mg/kg.d）；低劑量拮抗組：丙烯酰胺

2、100mg/(kg.d)+枸杞多糖（50mg/kg.d）。丙烯酰胺染毒、枸杞多糖給藥采用灌胃方式。正常組給予等體積生理鹽水灌胃。給藥連續(xù)28天。給藥結(jié)束后，禁食24小時(shí)，摘除小鼠眼球取血，處死小鼠。1.稱重小鼠附睪、睪丸，計(jì)算附睪、睪丸臟器系數(shù)2.顯微鏡計(jì)數(shù)小鼠精子畸形率。3，電化學(xué)發(fā)光法測定小鼠血清中血清睪酮（T）。4.吸光光度計(jì)測定并計(jì)算小鼠睪丸組織丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性。5.檢查小鼠睪丸組織病理學(xué)改變情

3、況。6.免疫組織化學(xué)法檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)。7.原位雜交檢測小鼠睪丸組織端粒酶蛋白表達(dá)。8.TUNEL法檢測睪丸細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果：1模型組染毒結(jié)束后與正常組比較：附睪、睪丸臟器系數(shù)降低，精子計(jì)數(shù)減少、活動(dòng)率降低、精子畸形率增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；睪酮水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；睪丸中 SOD活性降低、MDA含量增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；出現(xiàn)睪丸病理學(xué)改變；

4、凋亡相關(guān)蛋白 Bax表達(dá)增高、Bcl-2表達(dá)降低、睪丸細(xì)胞凋亡增高、端粒酶表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；3拮抗組劑量拮抗組與模型組比較，附睪、睪丸臟器系數(shù)增高；精子計(jì)數(shù)、活動(dòng)率無差異，精子畸形率降低；睪酮水平增高，（但低劑量拮抗組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；睪丸中 SOD活性增高、MDA含量降低；睪丸細(xì)胞凋亡陽性數(shù)目降低，凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)降低（但低劑量拮抗組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）、Bcl-2表達(dá)增高；睪丸病理檢查損傷積分降低；端粒酶表達(dá)

5、升高（但低劑量拮抗組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）。
　　結(jié)論：1進(jìn)一步證實(shí)了丙烯酰胺對(duì)于雄性小鼠的生殖毒性。2丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的作用機(jī)制可能為：引起睪丸組織氧化損傷；誘導(dǎo)睪丸組織細(xì)胞發(fā)生了顯著的誘導(dǎo)性凋亡。3枸杞多糖具有拮抗丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的作用，其中高劑量組效果最為明顯。4枸杞多糖拮抗丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的可能機(jī)制為：抗氧化作用降低睪丸組織氧化損傷，調(diào)控BAX、BCL-2蛋白及端粒酶的表達(dá)，阻斷凋亡途徑，抑制生精細(xì)胞