亞低溫對(duì)延長(zhǎng)再建血運(yùn)治療時(shí)間窗及其對(duì)腦保護(hù)的研究.pdf

1、目的：再建血運(yùn)（再灌注）如溶栓治療是被公認(rèn)和各國(guó)FDA批準(zhǔn)的的急性缺血性卒中的唯一治療手段，但3小時(shí)治療時(shí)間窗的限制使多數(shù)多病人不能獲益。亞低溫（28-35℃）是最早在臨床實(shí)踐中被證實(shí)有確切療效的的神經(jīng)保護(hù)手段，而且缺血性腦損傷實(shí)驗(yàn)也證實(shí)亞低溫的神經(jīng)保護(hù)效果是最好的。為此，我們探討了再灌注期亞低溫能否延長(zhǎng)再建血運(yùn)（再灌注）治療時(shí)間窗及其機(jī)制，并探討再灌注期亞低溫的腦保護(hù)機(jī)制。 方法：1將120只SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、大腦

2、中動(dòng)脈完全閉塞24小時(shí)組（MCAO24h組）、常溫組：按再灌注時(shí)間點(diǎn)不同分為以下亞組：大腦中動(dòng)脈閉塞2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、5小時(shí)、6小時(shí)/灌注24小時(shí)組（MCAO2h再灌注組、MCAO3h再灌注組、MCAO4h再灌注組、MCAO5h再灌注組、MCAO6h再灌注組）；亞低溫組：按再灌注時(shí)間點(diǎn)不同分成與常溫組對(duì)應(yīng)的亞組。2實(shí)施亞低溫時(shí)將大鼠放入冰屋內(nèi)，調(diào)整冰屋內(nèi)冰袋數(shù)量，使大鼠肛溫維持在31±1℃，5h時(shí)后，將大鼠移至室內(nèi)環(huán)境復(fù)溫。亞低溫

3、在大腦中動(dòng)脈再通后即刻實(shí)施并持續(xù)5小時(shí)。線拴法制備大鼠大腦中動(dòng)脈缺血/再灌注模型。3采用免疫組化法檢測(cè)大鼠缺血/再灌注模型的AIF、Cyt C、HSP70和MMP-9、LN的表達(dá)，并進(jìn)行TTC染色觀察梗死體積，用干-濕重法測(cè)定腦含水量，對(duì)大鼠模型進(jìn)行Longa評(píng)分。 結(jié)果： 一再灌注期亞低溫與再建血運(yùn)（再灌注）治療時(shí)間窗的關(guān)系及其腦保護(hù)的研究結(jié)果 1、與腦梗死的近期結(jié)局MCAO24h組的梗死體積、Longa評(píng)分比

4、較：常溫組MCAO2-4h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-6h再灌注各組沒有顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注各組沒有顯著性差異（P>0．05） 2亞低溫各組的梗死體積、Longa評(píng)分和含水量均顯著低于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 二、再灌注期亞低溫延長(zhǎng)再建血運(yùn)（再灌注）治療時(shí)

5、間窗及其腦保護(hù)機(jī)制的研究結(jié)果 1細(xì)胞凋亡角度研究的結(jié)果 1．1缺血/再灌注各組（常溫組、亞低溫組）的AIF、Cyt C、HSP70均顯著高于假手術(shù)組（P<0．01）。 1．2亞低溫各組的AIF、Cyt C均顯著低于相應(yīng)常溫組，而HSP70各組陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)均顯著高于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 1．3與腦梗死近期結(jié)局MCAO24h組的AIF、Cyt C、HSP

6、70：常溫組MCAO2-4h再灌注組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注各組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）。 2．血管通透性角度研究的結(jié)果 2．1缺血/再灌注各組（常溫組、亞低溫組）的MMP-9的表達(dá)與層粘連蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0．817，P<0．01）。 2．2再灌注各組（常溫

7、組、亞低溫組）的MMP-9顯著高于假手術(shù)組（P<0．01）；層粘連蛋白顯著低于假手術(shù)組（P<0．01）。 2．3亞低溫各組的MMP-9均顯著低于相應(yīng)常溫組，而層粘連蛋白MCAO2-6h各組陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)均顯著高于相應(yīng)常溫組（MCAO2-5h各組P<0．01，MCAO6h組P<0．05）。 2．4與腦梗死近期結(jié)局MCAO24h的MMP-9、層粘連蛋比較：常溫組MCAO2-4h再灌注組有顯著性差異（P<0．01），MCAO5-

8、6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）；亞低溫組MCAO2-5h再灌注組有顯著性差異（P<0．01）； MCAO6h再灌注組無顯著性差異（P>0．05）。 結(jié)論： 1．再灌注期亞低溫可延長(zhǎng)再建血運(yùn)（再灌注）治療的時(shí)間窗，通過發(fā)揮再灌注期亞低溫的腦保護(hù)作用（通過同時(shí)抑制非caspase和caspase兩種凋亡途徑，提高HSP70的表達(dá)，以全面抑制半暗帶細(xì)胞的凋亡；對(duì)MMP-9的有效抑制使腦微循環(huán)破壞減輕，微循環(huán)承受再灌注

9、能力上升。），實(shí)現(xiàn)延長(zhǎng)治療時(shí)間窗的目的。 2．再灌注期亞低溫是一項(xiàng)理想的延長(zhǎng)再建血運(yùn)（再灌注）治療時(shí)間窗的手段：它從抑制半暗帶細(xì)胞的凋亡和減輕腦血管損傷提高微循環(huán)承受再灌注能力等多個(gè)角度阻斷或減緩缺血/再灌注后的惡性病理生理進(jìn)程，全面保護(hù)缺血/再灌注的腦組織，延長(zhǎng)時(shí)間窗的效果明顯。而其它延長(zhǎng)時(shí)間窗的治療手段，作用機(jī)制單一，針對(duì)性較差（一般不直接針對(duì)缺血/再灌注的病理生理），效果較弱；特別是臨床實(shí)際上，病人就診時(shí)不可能提前給予亞低