孕哺期及出生后BDE209暴露對(duì)子代小鼠血液系統(tǒng)影響.pdf

1、目的:多溴聯(lián)苯醚(polybrominated diphenyl ethers，PBDEs)，是一類溴化阻燃劑，共209種同系物。相對(duì)于低溴聯(lián)苯醚和多氯聯(lián)苯(polychlorinated biphenyls，PCBs)來(lái)說(shuō)，十溴聯(lián)苯醚(decabromodiphenyl，BDE209)具有低毒性，因此作為良好的添加型阻燃劑沿用至今。其毒性效應(yīng)及永久性損傷效應(yīng)仍存在爭(zhēng)議，歐洲和美國(guó)部分城市已經(jīng)開始禁止使用BDE209。PBDEs具有長(zhǎng)期

2、殘留性、生物蓄積性、親脂憎水等特性，易通過(guò)空氣、水、沉淀物、粉塵等環(huán)境介質(zhì)進(jìn)入食物鏈。目前，已在多種人體組織中檢測(cè)到相當(dāng)濃度PBDEs，包括乳汁、血液、臍帶血等。PBDEs不僅可以富集在脂肪組織中，甚至可以通過(guò)胎盤屏障在胎肝中蓄積，且蓄積程度隨著孕期延長(zhǎng)而增加。因此嬰兒、學(xué)齡兒童及職業(yè)暴露的工人成為高危暴露群體。目前，PBDEs的毒性作用（包括神經(jīng)毒性、發(fā)育毒性、免疫毒性和內(nèi)分泌毒性等）及機(jī)制研究是公共衛(wèi)生研究的熱點(diǎn)之一，對(duì)血液系統(tǒng)的影

3、響卻鮮有報(bào)道。本研究旨在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察BDE209孕哺期暴露對(duì)血液系統(tǒng)的影響，并結(jié)合對(duì)急性白血病兒童血清PBDEs負(fù)荷水平的調(diào)查，初步探討PBDEs對(duì)血液系統(tǒng)的潛在影響。
　　方法:1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究:(1)建立BDE209暴露小鼠模型:將75只雌性昆明小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組和高劑量組，通過(guò)灌胃方式暴露BDE20910 d后，與雄鼠合籠，每組選取懷孕時(shí)間相近(±2d)的8只母鼠孕期持續(xù)染毒至子鼠斷乳。第一代(F1)及第二代(

4、F2)子鼠斷乳后也按照母鼠相同的方式進(jìn)行染毒;(2)觀察記錄兩代子鼠的一般指標(biāo)，包括行為、毛發(fā)及體重變化;(3)收集子鼠外周血進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)檢測(cè);(4)采用尾部靜脈采血涂片法對(duì)小鼠的外周血進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查;(5)采用骨髓涂片法對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查;(6)采用短期培養(yǎng)法對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行染色體組型和數(shù)目的計(jì)數(shù)分析。2.急性白血病兒童PBDEs血清負(fù)荷水平調(diào)查:采用病例—對(duì)照研究方法，對(duì)大連地區(qū)某醫(yī)院急性淋巴細(xì)胞白血病的嬰幼兒，通過(guò)調(diào)

5、查問卷和收集外周血，結(jié)合氣相質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)方法，檢測(cè)PBDEs四種同系物(BDE47、99、100和153)血清負(fù)荷水平;對(duì)照組為年齡與性別配比的非血液病住院患兒。
　　結(jié)果:1.動(dòng)物研究:(1)一般狀況:與對(duì)照組比較，BDE209暴露顯著降低F1代出生后第30天(postanal day30，PND30)高劑量雌性小鼠體重(P＜0.05），PND16、60及90無(wú)顯著變化;低劑量及高劑量組雄性小鼠PND30顯著降低(P＜

6、0.05或P＜0.01); BDE209暴露均顯著降低F2代PND16、60、90高劑量雌性小鼠體重(P＜0.01)，PND30雄性小鼠體重顯著降低(P＜0.01); PND30低劑量雌、雄小鼠體重均顯著降低（P＜0.01）。(2)白細(xì)胞系統(tǒng):BDE209暴露對(duì)F1代小鼠白細(xì)胞系統(tǒng)無(wú)顯著影響;F2代PND30高劑量雄性小鼠白細(xì)胞總數(shù)顯著升高(P＜0.05)，PND60低劑量組白細(xì)胞總數(shù)顯著降低(P＜0.05)，PND60低劑量組雄性小鼠

7、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低(P＜0.01)，PND30高劑量組雌性小鼠中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高（P＜0.05），PND60、90中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)降低(P＜0.05)，低劑量組PND90天降低顯著(P＜0.01);淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)在低劑量組雄性小鼠PND60、90顯著降低(P＜0.05或P＜0.01);高劑量組雌性小鼠PND60單核細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低(P＜0.05）。(3)紅細(xì)胞系統(tǒng):F1代低劑量和高劑量組雄性小鼠在PND30紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白

8、(Hb)及紅細(xì)胞壓積的顯著降低(P＜0.05或P＜0.01);雌性小鼠在PND30紅細(xì)胞壓積顯著降低(P＜0.05); BDE209暴露對(duì)F2代小鼠紅細(xì)胞系統(tǒng)的影響較大，雌、雄之間差異較小，PND30除高劑量組血紅蛋白未觀察到顯著變化，兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積均顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，而PND90紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高（P＜0.05）。(4)血小板系統(tǒng):F1代高劑量組雌、雄小鼠、低劑量雌性小鼠PND30血

9、小板計(jì)數(shù)均顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，PND60、90未觀察到顯著改變;F2代低劑量組雌、雄小鼠和高劑量雄性小鼠PND30血小板計(jì)數(shù)顯著升高(P＜0.05或P＜0.01)，F(xiàn)2代低劑量組雌、雄小鼠PND60及雌性小鼠在PND90血小板計(jì)數(shù)均顯著升高(P＜0.05或(P＜0.01)。(5)外周血形態(tài)學(xué):F1代低劑量組PND30、60，高劑量組PND90檢測(cè)到外周血白細(xì)胞增多。PND90低劑量組1例外周血涂片見較多異形深染淋巴細(xì)

10、胞，且成簇出現(xiàn)。F2代PND120高劑量組1例小鼠涂片見棘紅細(xì)胞增多。(6)骨髓形態(tài)學(xué):F1代PND60、90低劑量組雌、雄性小鼠骨髓涂片觀察到骨髓增生明顯活躍。PND90高劑量組雄性小鼠觀察到1例骨髓增生異常，出現(xiàn)較多的巨形裸核細(xì)胞。F2代PND120高劑量組雌、雄各觀察到1例骨髓涂片分葉核粒細(xì)胞增多，約占有核細(xì)胞的25-30％。(7)骨髓細(xì)胞染色體核型分析:包括染色體組型和數(shù)目，暫未發(fā)現(xiàn)異常。
　　2.流行病學(xué)調(diào)查:截至目前，

11、共納入急性淋巴白血病和對(duì)照組兒童各31例，已對(duì)31例病例和3例對(duì)照四種類型PBDEs血清負(fù)荷檢測(cè)分析，對(duì)照組的BDE47均在檢測(cè)限值以內(nèi)，病例組檢出1例濃度為88.32 ng/g;BDE99、100、153除BDE99病例組1例未檢出，其它均在檢測(cè)限值以上，且與對(duì)照組相比，病例組BDE99、100、153均呈升高趨勢(shì)，兩組BDE99無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.108)，BDE100及153差異具有顯著性(P＜0.01）。
　　結(jié)論:孕哺