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文檔簡介
1、目的:通過荔枝核總黃酮(total flavonoids of litchi,TFL)作用于人肝星狀細胞LX2,研究TFL對LX2增殖及細胞周期的影響。初步探討TFL調(diào)控LX2細胞周期的相關(guān)作用機制,為TFL作為一種新的抗纖維化藥物提供理論依據(jù)。
方法:使用不同濃度(7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL)TFL處理LX2。采用CCK8法檢測細胞的增殖活力;對細胞進行PI染色后
2、,采用流式細胞儀分析各組細胞周期的分布情況;使用RT-PCR和Western blot技術(shù)測定TFL作用后LX2細胞中p27基因mRNA和蛋白的表達。
結(jié)果:TFL作用48h、72h可抑制LX2細胞增殖,且隨著時間延長,抑制效果更加明顯。在藥物作用72h后,7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL的不同濃度TFL對LX2細胞抑制率依次為7.42%±5.66%、9.88%±0.73
3、%、11.55%±3.35%、9.47%±3.67%、9.12%±5.35%,TFL最小劑量加藥組與對照組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/mL TFL加藥組相對各對照組的差異性均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。細胞周期檢測結(jié)果顯示,經(jīng)TFL干預(yù)72h后,7.8125、15.6250μg/mL加藥組和對照組細胞周期分布差異不具有統(tǒng)計學意義,而31.2500、62.5
4、000、125.0000μg/mL加藥組相較對照組G0/G1期細胞數(shù)改變差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),S期細胞量明顯增多(P<0.05),G2/M期細胞量則相應(yīng)減少,此期改變部分具有差異性,提示TFL可將LX2細胞阻滯在S期。RT-PCR和Western blot技術(shù)檢測各組p27在RNA和蛋白水平上的表達量,結(jié)果提示隨著TFL濃度增大,加藥組p27的mRNA和蛋白量較對照組明顯升高。
結(jié)論:荔枝核總黃酮抑制人肝星狀細胞增
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