荔枝核總黃酮對(duì)活化人肝星狀細(xì)胞增殖與NF-кB、α-SMA表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:研究荔枝核總黃酮(total flavonoids of litchi chinensis son n,TFL)對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-beta-1, TGF-β1）誘導(dǎo)的人肝星狀細(xì)胞（human hepatic stellate cell, HSC-LX2）增殖、凋亡與核轉(zhuǎn)錄因子-кB（nuclear factor kappa B, NF-кB）、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smo

2、oth muscle actin,α-SMA）表達(dá)的影響。
　　方法:體外培養(yǎng)HSC-LX2，TGF-β1刺激24h后給予不同濃度的TFL（80、160、320、640、800μg/ml）干預(yù)；給藥后24h、48h、72h，用MTT法分別檢測(cè)TFL對(duì)HSC-LX2增殖的影響；應(yīng)用Hoechst33258熒光染色來(lái)觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；采用熒光定量PCR檢測(cè)各組NF-кB、α-SMA mRNA的表達(dá)；Western blot檢測(cè)

3、各組NF-кB、α-SMA蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1.MTT檢測(cè)結(jié)果顯示TFL在一定程度上呈時(shí)間依賴(lài)性抑制TGF-β1誘導(dǎo)的HSC-LX2增殖，以作用48h最為明顯，其半數(shù)抑制濃度（IC50）為302μg/ml。2.TFL各劑量組作用48h后，Hoechst33258熒光染色顯示TFL各組細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞核固縮、邊聚和裂解、凋亡小體形成等凋亡形態(tài)學(xué)變化。3.HSC-LX2細(xì)胞中NF-кB和α-SMA基因的表達(dá)水平都降低，尤以300

4、μg/ml和600μg/ml藥物濃度組較明顯，與對(duì)照組比較，有顯著性差異（P<0.05）。4.HS C-LX2細(xì)胞中NF-кB和α-SMA蛋白的表達(dá)水平呈藥物濃度依賴(lài)性降低，尤以300μg/ml和600μg/ml藥物濃度組較明顯，與對(duì)照組比較，有顯著性差異（P<0.05）。
　　結(jié)論:1.TFL對(duì)活化HSC-LX2的細(xì)胞增殖有抑制作用，同時(shí)可促進(jìn)其凋亡，達(dá)到抗肝纖維化的作用，并且隨著TFL濃度和作用時(shí)間的增加，抑制作用更加明顯。2