結(jié)晶體對人THP-1單核細(xì)胞ABCA1表達(dá)及膽固醇流出的影響.pdf

1、背景:冠心病是人類健康的重大威脅，動脈粥樣硬化是其主要的病理基礎(chǔ)。在動脈粥樣硬化標(biāo)本常發(fā)現(xiàn)斑塊中存在形態(tài)不一的菱形空隙，即為膽固醇結(jié)晶被處理后留下來的痕跡。最近研究發(fā)現(xiàn)，微小膽固醇結(jié)晶被細(xì)胞吞噬后可導(dǎo)致溶酶體破裂，溶酶體內(nèi)容物釋放，激活NLRP3炎性體上調(diào)炎癥因子如IL-1β促進(jìn)動脈粥樣硬化炎癥。
　　痛風(fēng)是心血管事件特別是冠心病發(fā)生獨立危險因素。尿酸結(jié)晶（痛風(fēng)石）廣泛存在于痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)腔中，尿酸結(jié)晶與膽固醇結(jié)晶類似，同樣通

2、過NLRP3炎性體途徑上調(diào)炎癥因子水平。
　　ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)可介導(dǎo)膽固醇從細(xì)胞內(nèi)流出，對動脈粥樣硬化具有保護(hù)作用。ABCA1和膽固醇流出本身具有抗炎的作用，而ABCA1表達(dá)和膽固醇流出在炎癥狀態(tài)下受損。我們推測結(jié)晶體可能通過影響ABCA1蛋白表達(dá)和膽固醇流出促進(jìn)動脈粥樣硬化以及增加痛風(fēng)心血管風(fēng)險。
　　目的:探討不同結(jié)晶體刺激對人THP-1單核細(xì)胞ABCA1表達(dá)及膽固醇流出能力的影響。
　　方法:

3、分別以低劑量膽固醇結(jié)晶(0.5mg/ml)、高劑量膽固醇結(jié)晶（2.5mg/ml）、尿酸結(jié)晶（1mg/ml）以及陽性對照氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)(25ug/ml)干預(yù)人THP-1單核細(xì)胞，以不加干預(yù)的細(xì)胞為空白組，干預(yù)24小時后，提取各組細(xì)胞RNA和總蛋白，分別通過實時熒光定量PCR(Real-time polymerase chain reaction)及免疫印跡(Western Blot)方法檢測各組ABCA1 mRNA和蛋

4、白表達(dá)。另外，通過閃爍計數(shù)法檢測細(xì)胞膽固醇流出率。
　　結(jié)果:
　　1、與空白對照組相比，低劑量膽固醇結(jié)晶干預(yù)人THP-1單核細(xì)胞24小時后，ABCA1 mRNA和蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)，膽固醇流出率有下降趨勢，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2、與空白對照組相比，尿酸結(jié)晶干預(yù)人THP-1單核細(xì)胞24小時后，ABCA1 mRNA和蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)，膽固醇流出率有下降趨勢，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、與空白對照組相比，高劑量膽固醇結(jié)