CXCR7在急性單核細胞白血病中的表達及對THP-1細胞功能的影響.pdf

1、目的：本實驗主要探討了基質(zhì)細胞衍生因子-1α（stromal cell derived factor-1α，SDF-1α）受體CXCR7（CXC-chemokine receptor7，CXCR7）在急性單核細胞白血?。ˋML-M5）中的表達，及其對急性單核細胞白血病細胞系THP-1細胞增殖、凋亡和侵襲等功能的影響。
　　方法：采集10例初次診斷AML-M5患者外周血和10例正常人外周血，應(yīng)用Ficoll密度梯度離心法提取外周血單

2、個核細胞（PBMC）；體外懸浮培養(yǎng)人外周血急性單核細胞白血病細胞系THP-1細胞。（1）采用流式細胞術(shù)檢測初次診斷AML-M5患者、正常人PBMC幼稚細胞表面及THP-1細胞表面CXCR7表達；（2）采用Western Blot法檢測初診AML-M5患者PBMC、正常人PBMC及THP-1細胞CXCR7蛋白表達水平；（3）采用 RT-PCR檢測初診 AML-M5患者 PBMC、正常人 PBMC及THP-1細胞CXCR7 mRNA表達水平

3、；（4）采用CCK8法檢測SDF-1α/CXCR7趨化軸對THP-1細胞體外增殖活性的作用，CXCR7單克隆抗體11G8阻斷THP-1細胞表面 CXCR7表達后，觀察細胞體外增殖能力的變化；（5）采用 Annexin V/PI雙染標記法檢測CXCR7單克隆抗體對無血清培養(yǎng)條件下THP-1細胞凋亡的影響；（6）采用Transwell法觀察SDF-1α/CXCR7趨化軸對THP-1細胞體外侵襲能力的影響，CXCR7單克隆抗體阻斷細胞表面CX

4、CR7表達后，觀察細胞侵襲能力的變化。
　　結(jié)果：（1）初次診斷AML-M5患者PBMC幼稚細胞表面CXCR7表達高于正常對照（P<0.05），THP-1細胞表面 CXCR7也有高表達；（2）THP-1細胞、AML-M5患者PBMC中CXCR7蛋白水平明顯高正常對照（P<0.05）；（3）THP-1細胞、AML-M5患者PBMC中CXCR7 mRNA水平高于正常對照（P<0.05）；（4）SDF-1α刺激可增高 THP-1細胞增殖

5、活性，但這種增殖活性可被 CXCR7單克隆抗體抑制（P<0.01）；（5）CXCR7單克隆抗體不影響無血清培養(yǎng)條件下 THP-1細胞的凋亡（P>0.05）；（6）SDF-1α/CXCR7趨化軸促進THP-1細胞體外侵襲能力，CXCR7單克隆抗體可明顯抑制SDF-1α誘導(dǎo)的THP-1細胞侵襲（P<0.01）。
　　結(jié)論：（1）CXCR7在正常對照者中幾乎不表達，但在初診急性單核細胞白血病患者及急性單核細胞白血病細胞系THP-1細胞中

6、均有高表達。（2）SDF-1α可增強急性單核細胞白血病細胞系THP-1細胞的增殖活性，用CXCR7單克隆抗體11G8阻斷CXCR7與SDF-1α之間相互作用可有效減弱THP-1細胞增殖活性。（3）在無血清培養(yǎng)條件下，THP-1細胞的凋亡活性不受CXCR7單克隆抗體的影響。（4）SDF-1α/CXCR7生物軸參與急性單核細胞白血病 THP-1細胞的體外侵襲能力，同時應(yīng)用CXCR4和CXCR7兩種阻斷劑時能最大程度地降低SDF-1α誘導(dǎo)的T